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TRIS试剂在电泳缓冲液中的配置及应用你get到了吗

2020/10/24 13:30
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电泳缓冲液是核酸、蛋白质凝胶电泳系统的一个重要组成,是电泳场中的导体,也是维持电泳系统恒定 pH值的必要条件。它是指在进行分子电泳时所使用的缓冲溶液,用以稳定体系酸碱度。常见的核酸电泳缓冲液有:TAE、TBE、TPE等,它们有一个共同点,那就是里面都含有TRIS和EDTA。加入EDTA的目的是螯合Mg2+等离子,防止电泳时激活DNA酶,此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀,下面来介绍下TAE及TBE具体的配置方法和应用。

1.TAE的配置及应用

TAE是使用最广泛的缓冲系统。TAE其实就是Tris+乙酸+EDTA-K2,其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种(TAE和TBE)缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。

 

德晟TRIS库存充足

50×TAE Buffer 配制方法:

1、称量Tris 242g,EDTA 18.612g于1L烧杯中;

2、向烧杯中加入约800ml去离子水,充分搅拌均匀;

3、加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解;

4、用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存。

使用时稀释50倍或100倍 即1×TAE Buffer 或 0.5×TAE。

2.TBE的配置及应用

TBE是一种PCR技术中用到的缓冲液,TBE其实就是Tris+硼酸+EDTA-K2,

TBE配置方法:

  1. 使用液(0.5×)0.045mol/L Tris-硼酸 0.001mol/L EDTA 采用无菌水溶解混匀,溶液体积为1L。

2、浓贮存液(5×)TRIS27.5g,硼酸 20ml ,0.5mol/L EDTA 采用无菌水溶解混匀,NaOH调pH至8.0,溶液体积1L。

TRIS作为德晟的核心产品之一,其配置而成的缓冲系统具备较强的缓冲能力,能使溶液两极的pH保持基本不变。还能使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移,目前德晟的TRIS已经销往全国各地,产品品质及服务得到了客户的充分认可,想找靠谱的TRIS生产商,来德晟不会让你失望。

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

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