德晟新发现:鲁米诺可用于富马酸酮替芬分析检测

发布时间:

2020-11-29


富马酸酮替芬是第2代抗变态反应药物,主要用于治疗支气管哮喘、过敏性鼻炎、湿疹等疾病。目前,测定富马酸酮替芬的方法主要有分光光度法、高效液相色谱法、膜选择电极法和毛细管电泳法等。

化学发光分析法因其具有灵敏度高、线性范围宽、仪器操作简单等优点,被广泛用于药物及生化样品的直接测定。用化学发光和电化学发光分析法测定富马酸酮替芬的研究也有报道。但是基于高锰酸钾化学发光体系测定富马酸酮替芬的研究尚未见报道。试验发现,在碱性介质中,高锰酸钾可氧化鲁米诺(Lumino1)产生发光信号,富马酸酮替芬对该发光信号有强烈的增敏作用。

为此我们德晟技术部熊工程师进行了试验,并进行了分析得出了以下结论:

1、流动注射化学发光信号体系的流动注射化学发光信号见图。

由图可知:在碱性介质中,高锰酸钾可以氧化鲁米诺产生化学发光,当在该反应体系中加入富马酸酮替芬后,化学发光强度明显增强。

2、化学发光光谱

关闭荧光分光光度计光源,绘制鲁米诺-高锰酸钾-富马酸酮替芬溶液和鲁米诺-高锰酸钾溶液的化学发光光谱见

由图可知:两个发光体系的最大发射波长均在425 nm左右,与鲁米诺发光体的最大发射波长一致,说明两个化学发光体系的发光体均为激发态的3-氨基邻苯二甲酸根。鲁米诺-高锰酸钾-富马酸酮替芬体系的发光强度明显高于鲁米诺-高锰酸钾体系,说明富马酸酮替芬的加入增敏了鲁米诺一高锰酸钾体系的发光强度。

 

3、路和流量的选择

试验发现,溶液的不同混合方式对发光信号有很大的影响。对选定体系的多种流路进行了比较,结果表明,图1所示的流路发光信号稳定,较大,所以选择该流路进行分析。考察了不同流量对体系发光信号的影响。试验表明:随着流量的增加,先增大后减小,当流量达到1.9mL·min时达到最大值。试验选择各管路流量均为1.9 mL·min 。

 

4、氢氧化钠溶液浓度的选择

0.02~0.3 mol·L-4.范围内,考察了氢氧化钠溶液浓度对反应体系发光强度的影响。结果表明:当氢氧化钠溶液浓度为0.05~0.15Mol·L-1时最大且基本不变,试验选择氢氧化钠溶液浓度为0.1 Mol·L-4。

5、氧化剂的选择及其浓度

试验考察了高锰酸钾、铁氰化钾、过氧化氢、高碘酸钾等不同的氧化剂对体系化学发光信号的影响。结果表明:以高锰酸钾为氧化剂时化学发光增敏信号值大且稳定。其浓度为5.0×10-4mol·L-1时。最大,故试验选择高锰酸钾溶液浓度为5.0×10-4mol·L-1。

6、鲁米诺溶液浓度的选择

鲁米诺为主要发光物质,其浓度对发光强度、检测灵敏度、线性范围具有较大的影响。试验考察了鲁米诺溶液浓度在2.0×10-4~1.0×10-4mol·L_1范围内对体系发光信号的影响,结果表明:随着鲁米诺溶液浓度增大,化学发光强度不断增大,表明鲁米诺溶液浓度不宜过大;鲁米诺溶液浓度过小时,发光信号值较小且稳定性较差。兼顾稳定性及灵敏度,试验选择鲁米诺溶液浓度为3.0×10-4mol·L-1。

7、增敏剂的选择

试验分别考察了表面活性剂聚乙烯醇、十二烷基磺酸钠、氯化十六烷基吡啶、乳化剂、十二烷基苯磺酸钠、十六烷基三甲基溴化铵、十二烷基硫酸钠、伊环糊精、纳米银、纳米金、纳米铂等作为增敏剂对体系发光信号的影响。结果表明:以上增敏剂的加入对体系的发光强度没有明显的增敏效果。

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