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Tris缓冲区用途

2020/12/09 10:38
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三羟甲基氨基甲烷是两性离子缓冲剂,常用于生物学和科研实验中,当然现在也有很多直接用于医药和工业中的。那么tris不同缓冲区的具体用途是什么呢,怎样使用tris的缓冲区,了解tris的特性及不同生物技术,如电泳或者色谱法等。


TRIS基本信息:

CAS号:77-86-1

分子量:121.14 g / mol

公式:C 4 H 11 NO 3

可用pH范围:7.2-9.0

pKa(25°C):8.06

最大波长(λmax)λ: 260 nm Amax: 0.10:λ: 280 nm Amax: 0.08

 

 

TRIS试剂建议用于什么?

  1. 常用于凝胶电泳缓冲液(TAE或TBE)
  2. 通常用于制备Laemmli缓冲液(用于SDS-PAGE中蛋白质样品的变性和上样)
  3. 阴离子交换色谱法
  4. 用于评估细菌内毒素
  5. 对于毛细管电色谱(CEC),由于其离子迁移率低
  6. 用于金属的络合
  7. 可用于纠正酸中毒

在选择TRIS进行研究之前,应该考虑哪些问题?

  1. 在pH 7.5以下不是很有效
  2. 它具有潜在的反应性伯胺,通常可作为抑制剂
  3. 它倾向于渗透膜,因此不适合大多数细胞培养工作
  4. 对许多哺乳动物细胞有毒
  5. 它不适用于双辛可宁酸(BCA)分析
  6. 它可能会干扰蛋白质测定的Bradford染料结合方法
  7. 螯合钙和其他必需金属是众所周知的
  8. 含有Tris的溶液的pH值非常依赖于温度,因此在使用温度下制备Tris缓冲液非常重要
  9. 它可能与碳酸氢盐/ CO2缓冲系统相互作用

根据不同的行业领域的使用,考虑的点是不一样的,并且对于tris的级别要求也会不同,纯度及一些其他指标相对也会有差异,而这些因素往往是需要生物缓冲剂购买者和厂家能够进行深度的沟通才能更好的提供的。


有关TRIS的提示:

  • 在有机溶剂中具有高溶解度
  • 它与多种酶反应并抑制几种酶
  • 它可以使流行的RNase抑制剂DEPC失活

 

 

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问题列表

Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

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