中文  |  EN

欢迎来到德晟生化科技有限公司!

搜索

咨询热线:18062302654

 

>
>
缓冲液Bicine、Tris、MOPS在蛋白质转膜实验中的应用

精品案例

国内案例
国外案例

 

地址:湖北省鄂州市光谷联合科技城C8-2-2
电话:18062302654 
邮件:
18062302654@163.com
邮编:436032

CopyRight © 2019-2027    武汉德晟生化科技有限公司, All Right Reserved
鄂ICP备16017126号-1   网站建设:中企动力武汉

资讯详情

缓冲液Bicine、Tris、MOPS在蛋白质转膜实验中的应用

2020/12/25 13:30
浏览量

双羟乙基甘氨酸Bicine、三羟甲基甲胺Tris、吗啉丙磺酸MOPS都是生物学常用的缓冲剂,主要用于蛋白质、核酸相关的研究实验。有些实验中不只是用单独某种缓冲剂,而是几种配合使用。

在蛋白质的聚丙烯酰胺转膜实验中,上样缓冲液使用Tris缓冲液,电泳缓冲液使用Tris-MOPS-SDS体系,而转印缓冲液则使用Tris-Bicine体系,能分离分子量在205-45KDa的蛋白质,电泳速度快约40分钟完成,转膜效率高30分钟完成全部蛋白质转移。

 

 

德晟BicineTrisMOPS原料厂家供应

5X Sample Buffer5倍工作浓度上样缓冲液)

SDS 1.0 g,甘油Glycerol 5.0 ml,溴酚蓝 25 mg,三羟甲基氨基甲烷Tris base 150 mg(调节pH值至6.8),2-巯基乙醇 1.0 ml,去离子水10 mL

电泳缓冲液10X Running Buffer

Tris base 60.6g,吗啉丙磺酸MOPS 104.6gEDTA3.0gSDS 10.0 g,去离子水1升。

转印缓冲液 20X Transfer Buffer

Tris base 60g,双羟乙基甘氨酸Bicine 81.6g,去离子水1升。

电泳槽中电泳时,现将电泳凝胶放入槽中,倒入充足的1X电泳缓冲液,使得缓冲液覆盖上样胶孔5-7mm。外槽倒入充足1X电泳缓冲液以确保电泳时的冷却效果,外槽的缓冲液液面接近上样孔的底部为最佳。用移液枪或注射器,冲洗胶孔以去除气泡和存在于胶孔中的缓冲液。每孔蛋白质最大上样量50ug样品在1X样品缓冲液100℃条件下孵浴5分钟,最佳的上样量必须通过实验得出,上样过量将会导致涂抹带或者条带失真。样品中含有过量的游离碳水化合物也会导致条带失真电泳140V 30-45分钟,具体时间视目的蛋白质的大小而定。

电泳结束后,按设备说明取出电泳凝胶,进行染色或者转膜实验。取20X转印缓冲液50mL,用100mL甲醇或乙醇外加850毫升去离子水,即可配制成1X转印缓冲液。湿法转膜条件40V90分钟;或者半干方法转膜条件25V30分钟完成。

在蛋白质的凝胶电泳转膜实验中,用到了BicineTrisMOPS三种生物缓冲剂,本实验需要一定的操作经验,新手可以多作尝试。德晟除了缓冲溶液外还有多种缓冲剂原料,可以自己根据需要配置成不同的缓冲体系,对实验来说更经济和灵活。

德晟新闻资讯

问题列表

Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

联系德晟

地址:湖北省鄂州市光谷联合科技城C8
电话:18062302654

微信:whdsbio
邮件:
18062302654@163.com
邮编:436032
传真:0711-3704589