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酶制剂活性受影响的相关因素

2020/12/30 17:05
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酶制剂是应用越来越广泛的一类生物制剂,除了生物领域之外,在化工合成、食品加工、化妆护肤、医药合成、新型材料、环境治理等方面也有应用,其中酶制剂的活性是决定酶质量的关键性因素。

酶制剂属于一种特殊的蛋白制剂,所以其功能或作用直接受环境条件影响,在条件不符合的情况下,它的活性受影响非常大,甚至完全不起作用。酶制剂的活性也是其产品价格的决定性因素,通常都是按酶活计价,只有少数称重计价。

酶的活性与缓冲剂、温度、底物均有关

  1. 体系pH值对酶活的影响

每一种酶都有它合适的pH值,当其它条件不变, 酶催化反应速率再大时的pH值为最适pH值。为了维持酶催化的反应体系的pH值,将酶的作用发挥到最大,体系中需要添加合适的生物缓冲剂。

  1. 温度对酶活性的影响

酶的催化活性也需要合适的温度,否则酶的活性会大打折扣,而且温度过高甚至可能导致酶的蛋白质结构改变,酶变性可造成永久性失活。

  1. 酶的等电点

等电点是一个分子表面不带电荷时的pH,对于酶而言,两性离子所带电荷因溶液的pH值不同而改变,当两性离子正负电荷数值相等时,溶液的pH值即其等电点。酶的等电点是溶液正负离子电荷相等时的pH值,与酶的最适pH值是不同的概念,但有相关性,两者数值通常接近或相等。

  1. 酶的米氏常数

酶的Km值即米氏常数是指酶促反应达到最大速度Vm的一半时,底物的浓度,它只与酶的结构以及酶所催化的底物有关,与酶的浓度是无关的。米氏常数越小,酶与底物亲和力越好,最小值的底物是酶的天然底物或最适底物,可根据反应速度求出底物浓度或者根据底物浓度得出反应速度。

从以上可以看出,酶制剂的活性受影响的因素有pH值、温度以及所酶的底物,其中德晟提供的有酶制剂,TrisBicineCAPS等维持最适pH的缓冲剂,以及TOOSMAOS等酶联免疫使用的Trinders色原底物。

 

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
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