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谷氨酸脱氢酶GLDH的催化反应及检测原理

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谷氨酸脱氢酶GLDH的催化反应及检测原理

2021/01/04 17:05
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谷氨酸脱氢酶GLDHGlutamate Dehydrogenase)或GDH是一种体内氨基酸代谢相关的酶类,存在于肝、脑、肾组织中,通常作为肝脏疾病的一项检测指标。GLDH可催化L-谷氨酸脱氢生成α-酮戊二酸而进入三羧酸循环。

谷氨酸是一种酸性氨基酸,分子内含两个羧基,化学名称为α-氨基戊二酸,在生物体内的蛋白质代谢过程中占重要地位,参与动物、植物和微生物中的许多重要化学反应。谷氨酸(2—氨基戊二酸)有三种异构体,左式、右式和外消旋体。L-谷氨酸即是其左式谷氨酸,谷氨酸脱氢酶能脱氢(氧化脱氨)的就是L-谷氨酸。

 

谷氨酸脱氢酶催化原理与检测

谷氨酸脱氢酶主要存在于肝脏、心肌及肾脏细胞的线粒体中,少量存在于脑、骨骼肌及白细胞线粒体中。它除了能催化L-谷氨酸脱氢与其可逆反应之外,还具有催化其他氨基酸的功能,比如催化氧化L-缬氨酸、L-2-氨基丁酸及L-亮氨酸脱氨。

谷氨酸脱氢酶GDH检测原理:

 谷氨酸脱氢酶GLDH 成品的活性检测原理反应方程式 α-酮戊二酸α-Ketoglutarate + NH3 + NADH + H + 在谷氨酸脱氢酶催化下生成谷氨酸GLDH+ NAD + +H2O NADH。试剂: A 0.1 M Tris-HCl 缓冲液, pH 8.3 B 1.5M NH4Cl 溶液 C 0.225M α-酮戊二酸溶液(pH 7.0-9.0) D 7.5mM NADH 溶液 E 酶稀释液: 0.1 M Tris-HCl 缓冲液, pH 8.3NADH的消耗可以检测340nm的光吸收得到。测量时间:180s 延迟时间:60s 积分时间:120s 系数/因子:6.776 测量温度:30±13.2 样品准备 若待测样品为固体,可以按 10mg 样品/1000ul 超纯水比例溶解。溶解后于 2-8 度放置。

谷氨酸脱氢酶是肝脏中非常重要的酶,参与谷氨酸、α-酮戊二酸及其他氨基酸的代谢,所以血清GDH含量的检测是身体是否健康的一项重要指标。德晟提供的GDH酶制剂是试剂盒原料,主要用于生化检测和相关研究实验。

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