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影响磁微粒化学发光检测的关键因素看这里!

2021/01/22 17:05
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受新冠疫情的影响,诊断试剂盒逐渐走入大众的视线,化学发光是免疫检测先进,现阶段应用广泛的方法之一。与传统的ELISA,免疫比浊,POCT相比,具有更高的分析灵敏度,更宽的浓度检测范围以及更高的自动化程度。

目前化学发光的主流方法是磁微粒化学发光检测方法。在非均相CLIA(化学发光免疫分析)中,抗体或抗原通常固定在超顺磁性微球上作为固相,从而便于完成检测中的清洗步骤并减少潜在的非特异性吸附。

超顺磁珠超顺磁性微球的重要性主要表现在:1.磁珠增加表面积,提高灵敏度,加快反应速度。2.磁珠决定了分离清洗的效率。3.磁珠与抗体偶联,全程参与反应,与仪器性能高度匹配。

35年前,默克推出Estapor磁性微球,在CLIA和生物分离应用领域一直受到诊断试剂厂商认可。该产品被国际伙伴用于全球范围的检测中,同时兼容手动和自动平台,高度可表征、可定制且提供关键功能设计,匹配体外诊断试剂厂商需求。为帮助大家深入了解超顺磁珠超顺磁性微球,德晟科技将重点介绍影响CLIA检测性能的几个重要的磁微粒参数。

1.粒径——为什么选择1-2μm?

尽管微球通常是均一分散的,能在CLIA分析仪中保持悬浮状态,但如果未在分析仪中充分搅拌,粒径较大的微球仍可能发生沉降。较小粒径的微球具有更高的比表面积,可提高蛋白负载率,从而增强检测灵敏度。但粒径较小的微球需要的分离时间也更久。鉴于上述原因,CLIA检测常使用的是约1-2 μm的中型微球,因为它们恰好是粒径适中的方案。

 

单一大粒径的Estapor超顺磁性微球的透射电子显微镜视图

2.铁含量——磁微粒“魔力”的来源

磁性铁含量低的微球通常需要的分离时间更长,因此,CLIA应用通常会使用磁性铁含量在30%-50%的微球。普通或表面未修饰的微球可借助蛋白质与微球表面之间的疏水相互作用,通过吸附或被动偶联实现蛋白质轻松附着,因而广泛应用于蛋白质吸附过程。这种方法简单又具成本效益,但这种蛋白质固定方法的缺点是:①容易受到血液或血清组分的干扰;②作用可能很弱,易导致试剂不稳定,从而影响试剂的灵敏度和特异性。而作为一项成熟技术,羧基超顺磁微球可在抗体和微球表面之间建立牢固而稳定的连接。

德晟是专业的体外诊断试剂生产商,目前运用的主要是直接化学发光法,比如:吖啶酯化学发光和鲁米诺化学发光,化学发光试剂产品无论是在稳定性还是灵敏度方面都得到了顾客的一致认可,德晟的诊断试剂产品一直都能满足客户的应用需求,因此也赢得了一个超高的回购率。

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