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TBS缓冲液与PBS缓冲液有什么不一样

2021/01/26 13:30
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TBS或Tris base缓冲液和PBS缓冲液都是比较常见的几种缓冲溶液,分别是三羟甲基甲胺(氨丁三醇)配制的基础pH缓冲液和缓冲盐溶液,以及磷酸缓冲盐溶液,它们在应用上有什么差异呢?

在生化实验中,TBS和PBS缓冲液应用的都比较广泛,它们的作用都是调节反应体系的pH值,但又有各自的区别。今年来,TBS的应用越来越多,有超过磷酸盐缓冲液的趋势。

 

TBS缓冲液Tris base缓冲液原料

PBS在以往使用相对较多,是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline)一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。在过去它是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,缓冲范围很广;而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。

PBS磷酸缓冲盐溶液可稀释一般的有活性的生物制剂,比如稀释血清。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,但是蒸馏水是不具有盐平衡作用的,会破坏生物蛋白的结构及生物特性;而生理盐水又不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应,所以使用PBS是首选。有时要求较高PBS需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。

但是有金属离子的溶液体系中,磷酸体系会与常见的Ca离子、Mg离子以及重金属离子缔合生成沉淀。在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中已都使用Tris缓冲液,而很少再用磷酸盐。TBS是在Tris base缓冲液的基础上增加了NaCl、去污剂等,两者中Tris的占比也有差异。

TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液(Tris Buffered,Saline)或缓冲生理盐水。配制方法是:先以重蒸水溶解NaCl(3.5~9g,0.15mol/L),再加0.5mol/L Tris-HCl缓冲液100mL,最后加水定容至1L,充分摇匀使Tris终浓度为0.05mol/L。TBS中通常还添加去污剂Triton X-100(非离子型表面活性剂)一起使用,常用于免疫酶技术中漂洗标本。

TBS或Tris base缓冲液制作的主要原料都是三羟甲基氨基甲烷Tris,德晟是生产原料的厂家,还提供多种生化研究用的多种生物缓冲剂原料。

 

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