哌嗪二乙磺酸PIPES与磷酸盐缓冲液有什么不同

发布时间:

2021-01-29


哌嗪二乙磺酸PIPES是生物学实验中常用的一种生物缓冲剂,通常用于蛋白质或者细胞相关的研究实验。它与磷酸盐缓冲液相比具有很多优势,在许多要求较高的实验中需要用PIPES来代替PBS缓冲液。

生物学常用的缓冲液有很多,除PIPES缓冲液和PBS之外,还有Bicine、Tris、MOPS等。在许多有酶参与的反应体系中,如果酶或者蛋白需要有金属离子表现活性,这个时候就需要用不与金属离子形成配合物的缓冲剂。而PIPES的特点是与多数金属离子均不会形成稳定配合物,适用于含有金属离子的溶液体系中。

 

哌嗪二乙磺酸PIPES粉末试剂

 

在生物化学实验中的众多生物缓冲剂中应用最广泛的是磷酸盐缓冲剂。磷酸是三元酸,由于磷酸是二级解离,有两个pKa值,所以用磷酸盐配制的缓冲液,pH范围非常大。一般来说磷酸盐的钾盐比钠盐好,因为低温时钠盐难溶,而钾盐易溶。但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠,因为SDS会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。

磷酸盐缓冲液,适用的pH范围宽,温度影响小,稀释十倍后pH的变化小于0.1。在有金属离子的溶液体系中,磷酸体系会与常见的Ca、Mg离子以及重金属离子缔合生成沉淀。

比如羧肽酶B(外分泌蛋白酶)每分子含有一个Zn原子,因其是含有金属原子的酶,金属离子螯合剂如EDTA等会抑制酶活,因此在用羧肽酶B进行蛋白质和肽的测序反应体系时,体系内不能含有EDTA以及会络合锌离子的缓冲剂。

哌嗪二乙磺酸PIPES含有乙磺酸基团,但亲水性不如含羟基的HEPES,溶解时需要用氢氧化钠碱液来溶解。德晟的PIPES是配制缓冲液的原料,是粉末试剂,需要其缓冲溶液的也可以咨询技术人员溶液配制方法。哌

 

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