抗原抗体对于疾病诊断的重要意义及操作中需要注意的问题

在病理诊断中，随着各种抗体新的用途不断被发现及越来越多的新型抗体的出现，免疫组化在肿瘤诊断及鉴别诊断、分类、预后判断等方面产生了重大的影响。由于免疫组化技术也存在一些局限性，因此，深入研究免疫组化原理和技术，并努力实现规范化的操作，才能充分发挥免疫组化在病理的诊断及鉴别诊断、判断预后、指导临床治疗中的作用。

观察组织切片中抗原的数量及其在组织中的分布情况，对抗原进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学，由于抗原与抗体特异性结合，因此通过免疫组化使标记抗体的显色剂(酶、荧光素、同位素、金属离子等等)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)。其中最重要的方法石蜡切片对于组织形态保存好，有利于各种染色对照观察，而且能长期保存;石蜡切片中使用的甲醛固定剂对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中首选的组织标本制作方法。

应用抗病毒、细菌、真菌和寄生虫抗原的特异性抗体进行免疫组化染色，可以检测和诊断许多感染性疾病病原微生物，如乙型肝炎病毒(HBV)、巨细胞病毒(CMV)、人乳头状瘤病毒(HPV)、疱疹病毒(HSV)、丙型肝炎病毒(HVC)、细小病毒B19、人禽流行性感冒病毒(AIV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS)等等，免疫组化在感染性疾病诊断中具有及时性、低风险性、高敏感性、特异性、有效性等特点。

灵敏度高、精确性和特异性是一种理想的肿瘤标记物必须具有的，但至今所发现的肿瘤标记物还没有能完全满足这些标准。某些正常细胞也分泌一些肿瘤标记物，因此肿瘤细胞学并不是单独产生一种标记物，即选用一组抗体比单一抗体更有利。

为了保证免疫组化染色结果的可靠性，每个实验室都必须进行有效的质量控制，规范免疫组化操作流程与步骤，应注意以下几点：

1. 抗原修复的一致性:抗原热修复工具选用微波炉或高压锅，修复温度及修复时间要尽量一致，修复温度至少要达到100℃，且修复总时间不低于15min;修复液的PH值在7．0～8．0之间，如Tris(pH7～8)、EDTA(pH8．0)修复液;

2.熟悉抗体的阳性定位:每种抗体均有阳性定位，染色之前应确定该抗体阳性位置，是胞浆、胞膜或胞核，如ER、PR、P53、Ki-67定位于细胞核，若胞质或胞膜阳性也为假阳性;有的抗体可表现为二种阳性反应类型，如S-100可为核阳性也可伴有胞质阳性;癌胚抗原(CEA)定位于胞浆或包膜。胚抗原(CEA)定位于胞浆或包膜。

德晟是专业研发生产抗原抗体的体外诊断试剂厂家，除抗原抗体外，其他诊断试剂如生物缓冲剂，显色试剂，化学发光试剂等也在市场中占据着举足轻重的地位，虽然说免疫组化技术还存在着缺陷和不足，但德晟员工一直在工作中不断学习与研究，在实际操作中总结经验教训，努力实现操作规范化、标准化，这样才能充分发挥免疫组化在病理诊断及鉴别诊断、临床治疗中的指导作用。