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抗原抗体对于疾病诊断的重要意义及操作中需要注意的问题

2021/01/31 13:30
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在病理诊断中,随着各种抗体新的用途不断被发现及越来越多的新型抗体的出现,免疫组化在肿瘤诊断及鉴别诊断、分类、预后判断等方面产生了重大的影响。由于免疫组化技术也存在一些局限性,因此,深入研究免疫组化原理和技术,并努力实现规范化的操作,才能充分发挥免疫组化在病理的诊断及鉴别诊断、判断预后、指导临床治疗中的作用。

观察组织切片中抗原的数量及其在组织中的分布情况,对抗原进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学,由于抗原与抗体特异性结合,因此通过免疫组化使标记抗体的显色剂(酶、荧光素、同位素、金属离子等等)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)其中最重要的方法石蜡切片对于组织形态保存好,有利于各种染色对照观察,而且能长期保存;石蜡切片中使用的甲醛固定剂对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中首选的组织标本制作方法。

应用抗病毒、细菌、真菌和寄生虫抗原的特异性抗体进行免疫组化染色,可以检测和诊断许多感染性疾病病原微生物,如乙型肝炎病毒(HBV)、巨细胞病毒(CMV)、人乳头状瘤病毒(HPV)、疱疹病毒(HSV)、丙型肝炎病毒(HVC)、细小病毒B19、人禽流行性感冒病毒(AIV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS)等等,免疫组化在感染性疾病诊断中具有及时性、低风险性、高敏感性、特异性、有效性等特点

灵敏度高、精确性和特异性是一种理想的肿瘤标记物必须具有的,但至今所发现的肿瘤标记物还没有能完全满足这些标准。某些正常细胞也分泌一些肿瘤标记物,因此肿瘤细胞学并不是单独产生一种标记物,即选用一组抗体比单一抗体更有利。

了保证免疫组化染色结果的可靠性,每个实验室都必须进行有效的质量控制,规范免疫组化操作流程与步骤,应注意以下几点

  1. 抗原修复的一致性:抗原热修复工具选用微波炉或高压锅,修复温度及修复时间要尽量一致,修复温度至少要达到100℃,且修复总时间不低于15min;修复液的PH值在7080之间,如Tris(pH78)EDTA(pH80)修复液;

2.熟悉抗体的阳性定位:每种抗体均有阳性定位,染色之前应确定该抗体阳性位置,是胞浆、胞膜或胞核,如ERPRP53Ki-67定位于细胞核,若胞质或胞膜阳性也为假阳性;有的抗体可表现为二种阳性反应类型,如S-100可为核阳性也可伴有胞质阳性;癌胚抗原(CEA)定位于胞浆或包膜。胚抗原(CEA)定位于胞浆或包膜。

德晟是专业研发生产抗原抗体的体外诊断试剂厂家,除抗原抗体外,其他诊断试剂如生物缓冲剂,显色试剂,化学发光试剂等也在市场中占据着举足轻重的地位,虽然说免疫组化技术还存在着缺陷和不足,但德晟员工一直在工作中不断学习与研究,在实际操作中总结经验教训,努力实现操作规范化、标准化,这样才能充分发挥免疫组化在病理诊断及鉴别诊断、临床治疗中的指导作用。

 

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