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催化Trinder’s试剂的过氧化物酶使用须知

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催化Trinder’s试剂的过氧化物酶使用须知

2021/02/05 13:30
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在酶联免疫分析中,底物Trinders试剂用于检测都需要酶的催化,酶指的就是过氧化物酶PODHRP,不管是试剂盒中还是实验检测,POD酶制剂都是很关键的,因此想要更好的做好检测就需要用好过氧化物酶,也就需要了解其理化性质。

 

Trinders试剂与过氧化物酶用于酶免分析

过氧化物酶与pH缓冲剂的关系:

首先,所有酶的催化活性都对反应体系的pH有要求,当然过氧化物酶POD也不例外,需要配置合适的pH缓冲液来维持反应体系的pH值。但是过氧化物酶一般都含有多种同工酶,因此最适pH范围比较宽。HRP应用较多,是POD的一种,它是指从植物中提取的辣根过氧化物酶。

酸性状态下,过氧化物酶血红素与蛋白质部分分离,酶蛋白从天然状态变成可逆变性状态,活力下降,且热稳定性低;在中性和碱性状态,酶处于天然状态,蛋白质结构含α-螺旋结构,稳定,酸化后结构破坏,产生β-结构。

过氧化物酶与温度的关系:

POD的反应除了对pH有要求外,对温度也有要求。不同来源的过氧化物酶最适作用温度存在着很大的差别,一般是35-60℃。如马铃薯的POD最适温度是55℃,而花菜中的POD只有35~40℃。

POD的热失活特性具有双相性和可逆性,它含有不同的耐热性质部分,不耐热部分热处理时很快失活,而耐热部分在同样地温度是缓慢地失活。不同来源的POD也具有不同的耐热性,一般植物的POD酶活越高的,其耐热性也越高。低水分含量也会增加POD的耐热性。降低pH和增加氯化钠浓度也会增加酶失活的速度。

由上可知,Trinders试剂在检测过程中,需要控制好合适的温度和pH值,来保证过氧化物酶的催化活性,保证检测的准确性和灵敏度,生物缓冲剂的使用也是必不可少的。德晟提供Trinders试剂、缓冲剂、酶制剂等一系列体外诊断所用的试剂。

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