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酶联免疫分析中HRP的化学发光底物和荧光底物的比较

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酶联免疫分析中HRP的化学发光底物和荧光底物的比较

2021/02/11 13:30
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在酶联免疫分析中应用较多的酶制剂便是HRP辣根过氧化物酶,其在生化检测中有三种类型的底物主要有三种,分别是色原底物TOOSMAOS,荧光底物,化学发光底物如鲁米诺等。其中化学发光底物还应用于目前越来越热门的化学发光分析中。

无论是色原底物、荧光底物还是化学发光底物,其都是作为一种标记和检测手段,对检测结果的准确性和灵敏度有着关键性的作用,目前最热门的便是化学发光免疫分析。

 

鲁米诺HRP化学发光底物

生化检测中不同底物的发展:

从检测方法的发展时间上来说,荧光底物是在色原底物之后发展出来的过氧化物酶的产物,检测灵敏度也比色原底物更高,可同时用几种不同颜色的荧光材料,但设备昂贵,检测成本高,也容易受细胞或其它分子产生的自发荧光干扰,观测和保存时对光敏感不稳定。荧光底物之后,鲁米诺类化学发光底物的发现使得辣根过氧化物酶HRP的底物发展进入一个快速发展的阶段,各种化学发光底物极大丰富了辣根过氧化物酶的应用。

化学发光与荧光区别:

化学发光则与荧光不同,是指在化学反应的过程中所产生的化学能被吸收使分子激发而发射的光,荧光则是吸收了光能使分子激发而发射的光,这就是化学发光与荧光的区别所在,暨二者形成激发态分子的激发能的形式不同,一种为化学能,一种为光能。化学发光检测灵敏度高、背景低, 因而得到广泛应用。

目前常见的化学发光底物,包括鲁米诺类、过氧草酸酯类,以及吖啶酯类,它们在实际的化学分析测定中是常用的几种化学发光试剂,在药物分析,环境监测等领域也有着重要的应用。上述几种化学发光试剂德晟都有专门生产,不过需要注意的是吖啶酯可以直接发光并不需要酶的催化。

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