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吖啶酯化学发光法检测标记白介素6所需试剂

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吖啶酯化学发光法检测标记白介素6所需试剂

2021/03/05 13:30
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新冠病毒的抗体检测中化学发光法就是其中重要的检测方法,常用的发光试剂吖啶酯除了检测各种抗体之外,还能用于多种生物大分子的标记检测,例如人体防御机制中重要的细胞因子白介素6的检测。白介素6可由多种免疫功能的细胞或其它细胞产生主要作用为:促进B细胞增生分化和分泌抗体,对肝细胞、T细胞、神经组织、造血体统也具有广泛效应以及抗瘤效应等等。它也可称为β2干扰素、肝细胞刺激因子、杂交瘤细胞生长因子、B细胞分化因子等。

化学发光试剂吖啶酯

吖啶酯检测白介素6所需试剂:

高灵敏度和特异性的吖啶酯化学发光法检测白介素6方法,该试剂盒包括样本稀释液、包被有白介素6单克隆抗体的磁性微粒、标记有化学发光标记物的白介素6单克隆抗体、激发液A、激发液B、白介素6校准品溶液以及清洗液。常用来标记白介素6的吖啶酯有NSP-DMAE-NHSNSP-SA-NHS等。吖啶酯与抗体的摩尔比为510:1,优选摩尔比为7.4:1

样本稀释缓冲液液为pH7.4的磷酸盐缓冲液,内含1%牛血清白蛋白、0.1%TritonX-1000.3%Proclin所用磁珠的表面修饰基团可以为羧基、氨基、链霉亲和素-生物素或对甲苯磺酰基,磁珠粒径可为1.53μm。磁微粒可直接与白介素6抗体偶联,也可将磁微粒与链霉亲和素偶联,同时采用生物素标记白介素6抗体。白介素6单克隆抗体是待检白介素6的特异性单克隆抗体。

吖啶酯检测白介素6准备流程流程:

  1. 制备样品稀释缓冲液。
  2. 制备包被有白介素6单克隆抗体的磁性微粒:将羧基化的磁微粒溶液磁分离后去上清,用MES缓冲液重悬,加入EDC溶液,在垂直旋转仪上活化,将活化后的磁微粒与白介素6抗体放置在垂直旋转仪上偶联,磁分离去上清,洗涤3次,再加入含1%BSA的缓冲液进行封闭,最后将磁微粒悬液置于2-8℃保存。

除了NSP-DMAE-NHSNSP-SA-NHS这两种吖啶酯发光试剂之外,德晟还研发了4种吖啶酯,以更加匹配不同的抗体、蛋白、核酸等待检测物质。

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