PCR扩增曲线异常是否由病毒保存液所致

在新冠病毒核酸检测中，非常关键的技术就是核酸的实时荧光定量PCR实验，它是新冠检测的核心技术。那么病毒采样关节所使用的病毒保存液对核酸的PCR扩增有什么影响呢？本文作简单探讨。

病毒保存液是否影响核酸PCR扩增

从PCR扩增曲线判断结果：

新冠检测中荧光定量PCR仪器已成为分子生物学研究的常规设备，这种检测方法的迅速发展，检测任务的紧急也对检测人员提出了更高的要求，需要他们具备熟练判断数据结果的能力。对于荧光定量PCR的结果的判断，最直观的判断就是看扩增曲线是否正常。平时实验中会遇到异常扩增曲线的困扰，比如打折的扩增曲线、复孔间重复性不好、阴性样本扩增曲线抬升等。

PCR扩增曲线异常原因：

1. 确认软件设置是否正确，对照试剂盒说明书，检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确，所选用的试剂中是否含有ROX来作为参比荧光染料。有些结果，多组分图扩增曲线没有抬升，明显是阴性样本，但扩增图谱曲线抬升了，这样就会与阈值线相交，反而有了CT值。这是由于软件在进行基线自动扣除出错，手动调整基线的方法，重新定义基线即可正常。
2. 确定耗材及仪器配件是否使用正确。耗材对于荧光定量PCR来说比较重要，很多异常的扩增曲线是由于耗材使用不当引起的。
3. 确定所用试剂是否正常，首先要确定试剂是否有效，包括查看试剂是否在有效期内，是否反复冻融多次，运输条件是否正常。如果上述几种都正常，那就要考虑操作细节上是否有疏忽了。

从以上几点可以看出，病毒保存液不会对扩增曲线直接产生影响，它只会影响病毒的样本，不过这可以通过阳性样本进行对照实验，确定病毒保存液是否对病毒样本产生了影响。德晟的病毒保存液有两种类型，灭活型和非灭活型都适用于核酸的PCR实验。