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吖啶酯相比其它化学发光底物的优势
2021/03/19 13:30
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吖啶酯化学发光试剂是管式化学发光中比较有优势的一种试剂,与鲁米诺、AMPPD、三联吡啶钌等化学发光底物相比,具有独特优势,它具有超高的灵敏度且操作简便,易于自动化操作。
吖啶酯化学发光反应无需催化剂:
不同的吖啶酯化学发光底物
吖啶酯(包括吖啶磺酰胺)在碱性条件下被过氧化氢氧化时,发出波长为470nm的光,具有很高的发光效率,其激发态产物N-甲基吖啶酮是该发光反应体系的发光体。不需要酶的催化作用,直接参与发光反应。
吖啶酯可直接与抗体或磁珠相结合:
免疫分析时,用吖啶酯直接标记抗体(抗原、或磁珠),与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-吖啶酯标记抗体的复合物,冲洗后只需加入氧化剂(过氧化氢)和氢氧化钠使成碱性环境,吖啶酯在不要催化剂的情况下分解,发光。
鲁米诺、AMPPD发光需酶参与:
这类属于酶促反应的发光底物,鲁米诺需过氧化物酶POD或HRP催化发光,AMPPD则需要碱性磷酸酶的催化发光反应。由于反应中加入了酶,而酶的活性受温度以及环境pH值的影响,因此反应体系相对复杂,除了考虑被标记蛋白所需pH外还需要考虑酶的合适pH值。
三联吡啶钌使用成本高:
这种发光底物属于电化学发光,优点在于检测快速,可控的反应条件,检测范围宽,精密度灵敏度高,低标本检测用量。但缺点在于:仪器采用的流动比色池,交叉污染为潜在问题;对环境因素和其它非特异性反应过于敏感;检测仪器贵,国内使用较少。
综上所述,吖啶酯类发光剂优点在于无需酶的催化,无需增强剂,从而降低了背景发光,提高了信噪比,干扰作用少,而且使用和研发成本远低于电化学发光。德晟研发的吖啶酯有六种,包括DMAE-NHS、Me-DMAE-NHS、NSP-DMAE-NHS、NSP-SA-NHS等。
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