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化学发光免疫、荧光免疫、胶体金免疫的区别

2021/03/23 17:05
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在体外诊断领域,免疫分析技术有很多,常用的就是化学发光免疫、荧光免疫、胶体金免疫,那么这些免疫分析技术有什么区别呢?

在免疫分析方面,化学发光免疫或其它免疫都是一样的,都是利用抗原与抗体结合的特异性免疫反应来检测,只是抗原或抗体的标记物不一样(通常是标记抗体),因此而造成检测方法上的区别,灵敏度和抗干扰方面也不一样。

多种化学发光试剂吖啶酯

标记信号物的区别:

化学发光的标记信号物是发光试剂吖啶酯、鲁米诺AMPPD吖啶酯同时作为标记物和信号物,而鲁米诺通常作信号物,把催化反应的酶HRP作为标记物;胶体金的信号物是1-100nm直径范围里的纳米金颗粒,通常是10-25nm,通常在520nm处有吸收峰,因此肉眼可见红色胶体银、胶体碳也可以归为这类;荧光层析的信号物顾名思义就是发荧光物质,给与适合的激发光就能发射出相应的荧光,不同的荧光显示出不同的颜色。

标记原理区别:

化学发光免疫和荧光免疫通常是与抗体进行化学偶联,比如吖啶酯或荧光素以NHS基团与伯胺基连接或通过EDCI缩合连接,标记结合物稳定,较大程度抵抗基质的影响,特异性更好;而胶体金与抗体通过静电吸附作用偶联,容易被样品中的基质影响,过酸过碱过盐都会影响。

灵敏度的区别:

胶体金是可见光颜色信号,荧光是穿透光,因此荧光层析的灵敏度要比胶体金高起码一个数量级,而化学发光是直接发光,不需要像前两者那样需要光源照射,光源的不同会造成检测结果差异。制备胶体金不稳定因素多,只能用于定性检测,荧光物质稳定性要更好适合用于半定量检测基本定量检测,而吖啶酯化学发光可以做到定量检测。

虽然不同的免疫分析方法有区别,但不是说哪一种就绝对的好,比如不同波段的荧光可显示不同颜色,可多指标同时检测,胶体金探针制备简单成本低等。化学发光免疫分析相对先进,是检测技术发展的主流,德晟因此也着重研发化学发光试剂吖啶酯、鲁米诺等。

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