化学发光试剂鲁米诺的制备原理

化学发光试剂鲁米诺指的的是3-氨基邻苯酰肼，其实它还包含异鲁米诺（4-氨基邻苯酰肼）以及氨基邻苯酰肼类衍生物如ABEI、ITCI等。鲁米诺是CLIA中-开始就使用的化学发光底物，现应用已非常广泛。

鲁米诺制备原理：

3-氨基邻苯酰肼由3-硝基邻苯二甲酸作为原料制得，将原料脱水后可制成3-硝基邻苯二甲酸酐（该中间体可用于有机合成和醇类测定），经过硝化，既可获得3-硝基-邻苯二甲酸．同时也会得到4-硝基-邻苯二甲酸。这两种产物与联氨（肼）反应后分别得到鲁米诺和异鲁米诺。

鲁米诺发光试剂的制备原理

在3-硝基-邻苯二甲酸分子中，硝基对邻位羧基影响很大，它和羧酸会形成分子内氢键，加上相邻二羧基之问存在的分子内氢键，对整个羧酸分子的解离产生显著的抑制作用，从而导致其水溶性下降。在4-硝基-邻苯二甲酸中，硝基与羧酸之间难以形成分子内氢键，因而，它在水中的解离度相对要大一些，水溶性也好一些。邻苯二甲酸酐硝化后产生的异构体正是利用它们在水溶性上的差异加以分离的。其反应式如下：

鲁米诺在水溶液中的化学发光量子产率为1.0％～1.5％，最大发射光波长为425 nm，利用氨基与其他化合物连接。现在主要是通过催化鲁米诺的酶HRP或POD来标记抗体或蛋白。早期用鲁米诺直接标记抗原或抗体，但当它标记到抗原或抗体分子上后，发光活性明显降低，光子产率降为原来的10％，主要原因是标记后产生空间位阻。

鲁米诺既能用于刑侦上微量血迹的检测，也能用于体外诊断中的化学发光酶联分析，应用广泛技术成熟。德晟是专门研发生产鲁米诺与异鲁米诺试剂的厂家，产品受到国内外客户的青睐。