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吖啶酯与不同的吖啶酯衍生物

2021/05/14 13:30
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吖啶酯是一类化学发光试剂,能作为生化检测中的标记物、指示物或示踪物,能使看不见的物质被看见或展示其反应轨迹。从传统吖啶酯的出现到现在,已经有许多种类的吖啶酯及其衍生物了。

 

不同的吖啶酯化学发光试剂

吖啶酯化学发光试剂是通过化学键与特定的蛋白、抗体、抗原或核酸等直接标记。标记反应实际就是一种特定的化学反应,所以标记后的产物稳定性比较好(不同于胶体金的静电吸附)。由于只会与特定基团反应,标记特定的基团,标记反应的特异性好,不像静电吸附坑会吸附上不需要的干扰物。

吖啶酯中常含有的琥珀酰亚胺基团(NHS ester)只会与蛋白、抗体等分子上的一级氨基反应,NHS成为离去基团,蛋白或抗体与吖啶酯母体通过肽键相连,结合稳定。蛋白质、抗体或酶本身是由氨基酸脱水缩合而成,含有大量羧基和氨基,通常可以用吖啶酯NHS酯标记。

但也有例外,有些蛋白的氨基都参与了脱水缩合成键,没有游离氨基或者氨基受到空间结构影响,所以吖啶酯的NHS基团不能直接标记,另外核酸通常没有游离氨基,也不能用NHS基团标记。因此就开发出了多种不同的吖啶酯衍生物,来满足不同分子的标记需求。

  1. NSP-DMAE-ADH,这是一种吖啶酯己二酰肼,可以通过缩合剂来标记核酸。
  2. NSP-SA-ADH,与前者类似,可通过缩合剂标记核酸,但将二甲基苯甲酯基团换成了磺酰胺,亲水性更好,可使一些实验步骤在水溶液中操作。
  3. NSP-SA-NHS,NSP-DMAE-NHS,NSP-DMOAE-NHS,NSP-DMOAE-PEG-GT-NHS等这些均属于NHS酯,可直接标记含以及氨基的蛋白。

除此之外,被标记的蛋白中不参与标记的基团也可能对实验造成影响,如巯基可能引起吖啶酯水解等,因此也需要对吖啶酯进行调整改变其抗水解性能。德晟提供的吖啶酯目前有六种,能标记绝大部分的蛋白、抗体、核酸。

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