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肌氨酸氧化酶SOX的最适反应条件

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肌氨酸氧化酶SOX的最适反应条件

2021/06/01 17:05
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肌氨酸氧化酶(sarcosineoxidase,EC1.5.3.1)简称SOX属于黄素蛋白质,可偶联肌酐酶和肌酸酶将肌酐降解为甘氨酸、甲醛和过氧化氢,然后通过色原底物TOPS、TOOS等还原H2O2显色来检测肌酐水平,从而判断肾功能健康程度。

SOX酶的最适反应条件意义:

酶的最适反应条件包括反应温度和反应环境的pH值,SOX作为一种重要的酶制剂,其最适反应温度和pH值是检测实验的重要参数。只有先确定好了这两个参数,才可以去选择合适的生物缓冲剂,确定所用的色原底物或其它试剂是否适用这个pH值或温度。

肌氨酸氧化酶SOX最适反应条件

肌氨酸氧化酶最适温度:

只要是酶就有最适反应温度和pH值,SOX当然也不例外。温度和pH值是影响酶反应速率的重要因素,酶分子只在一定温度和pH范围内具有酶活性。SOX(芽孢杆菌基因工程制备,相对分子质量为43.8kDa)在20~80℃范围内均具有一定的酶活性,其最适反应温度为40℃。

肌氨酸氧化酶最适pH值:

在pH 8.0-11.0范围内,重组SOX酶具有较高的酶活力,在pH8.0和pH11.0的反应体系中可以获得相同的酶活。肌氨酸氧化酶催化底物时,肌氨酸以兼性离子形式结合于SOX活性中心;而在脱甲基氧化过程中,肌氨酸则是以阴离子形式存在。底物的结合受到pKa7.4和10.2两个离子化参数的影响。对于肌氨酸其α-氨基的解离常数pKa为10.01。

在pH8.0的体系中,肌氨酸以适宜浓度的兼性离子存在,促进酶与底物的结合;在pH11.0的体系中,肌氨酸其α-氨基已去质子化状态,以较适浓度的阴离子形式存在,促进催化作用的进行。因此SOX在pH8.0和pH11.0的体系中呈现较高的酶活力,都可以作为其最适反应pH值。

肌氨酸氧化酶的最适反应温度(40℃)和pH值(8和11)是酶催化效率最高的,酶的活性得到充分利用,这样实验检测的灵敏度也更高。德晟可提供肌酐检测所需的色原底物、缓冲剂、酶制剂SOX等多种ivd原料。

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