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MOPS缓冲液作为无磷培养基的的配方及注意事项
在以前的很多文章中，我们介绍过MOPS培养基的一些配置方法，但是并没有讲具体在配置过程中需要注意的事项，今天此文会非常详细的把一些事项列举出来，对于那些还没有配置过MOPS培养基的朋友们，我们准备了一些MOPS培养基的配置方案。希望能给大家一些指引和帮助。
MOPS Minimal Medium
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10X MOPS混合物 |
100毫升 |
|
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0.132M K2HPO4 |
10毫升 |
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H2O |
880毫升 |
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1mg / ml硫胺素 |
0.1毫升 |
（可选-我们不使用硫胺素，因为它不会影响此培养基中大肠杆菌K-12 MG1655的生长速率。） |
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全部的 |
990毫升 |
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1.混合上面的成分，并用大约300微升的10M NaOH将pH值调节到7.2。
2.过滤消毒。可以在4度下保存长达1个月。
3.使用前，添加10 ml 100X碳源（适当时-我们通常使用0.1％葡萄糖的最终浓度）。
10X MOPS混合物
1.在带有搅拌棒的1 L烧杯中，将以下物质添加到约300 ml milliQ H2O中：
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成分 |
固件 |
克 |
|
MOPS |
209.3 |
83.72 |
|
Tricine |
179.2 |
7.17 |
2.添加10 M KOH使其最终pH值为7.4（10至20 ml）
3.使总体积达到440ml。
4.制备新鲜的FeSO4溶液并将其添加到MOPS / Tricine溶液中：
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成分 |
固件 |
克 |
H2O体积（毫升） |
库存浓（M） |
|
FeSO4 •7H2O |
278 |
0.028 |
10 |
0.01 |
5.将以下解决方案添加到MOPS / tricine / FeSO4中（请参阅下面的方法，制作每种方法）：按所示顺序混合！
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成分 |
体积 |
|
1.9M NH 4氯 |
50毫升 |
|
0.276M K2SO4 |
10毫升 |
|
0.02M氯化钙2•2H2O |
0.25毫升 |
|
2.5 M氯化镁2 |
2.1毫升 |
|
5 M氯化钠 |
100毫升 |
|
微量营养素库存 |
0.2毫升 |
|
高压灭菌milliQ H2O |
387毫升 |
|
全部的 |
1000毫升 |
6.用容量为1L的0.2微米过滤器进行过滤灭菌
7.等分到100或200ml无菌塑料瓶中，并在-20°冷冻。
10倍MOPS混合物中使用的方法
分别制作，将指定的量混合到指定的体积中。存放在室温下。
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成分 |
固件 |
库存浓（M） |
克 |
体积（毫升） |
笔记 |
|
NH4Cl |
53.49 |
1.9 |
50.82 |
500 |
|
|
钾2SO4 |
174.3 |
0.276 |
4.8 |
100 |
|
|
氯化钙2•2H2O |
147 |
0.02 |
0.294 |
100 |
|
|
氯化镁2 |
203.3 |
2.5 |
50.75 |
100 |
|
|
氯化钠 |
58.44 |
5 |
292.2 |
1000 |
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微量营养素储备液（100毫升）
将所有内容混合在40ml高压灭菌的milliQ H2O中，使总体积达到50ml。存放在室温下。
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成分 |
分子式 |
固件 |
克50毫升 |
|
钼酸铵 |
（NH4）6Mo7O24•4H2O |
1235.9 |
0.009 |
|
硼酸 |
h3BO3 |
61.83 |
0.062 |
|
氯化钴 |
CoCl2 |
237.9 |
0.018 |
|
硫酸铜 |
CuSO4 |
249.7 |
0.006 |
|
氯化锰 |
MnCl2 |
197.9 |
0.040 |
|
硫酸锌 |
ZnSO4 |
287.5 |
0.007 |
磷酸钾K2HPO4溶液：
笔记！！确保使用二元K2HPO4，并且不要使用二元KH2PO4！！！高压灭菌后可在室温下保存。
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成分 |
固件 |
库存浓（M） |
克 |
体积（毫升） |
笔记 |
|
K2HPO4 |
173.2 |
0.132 |
23.0 |
1000 |
高压灭菌器 |
