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Tris的提纯及在生化领域中的应用

2021/06/07 13:30
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三羟甲基氨基甲烷Tris,也称为氨丁三醇,在有机合成、涂料、防火材料以及生化和医药领域都有应用。其中,用于工业的Tris纯度会稍低一点,用于生化领域需要进一步的提纯,在生化领域它主要是作为生物缓冲剂。

工业级Tris提纯方法

Tris用于生物缓冲剂时,需要分析纯的试剂,如果是工业级的Tris,可以进行提纯使其成为分析纯试剂。提纯步骤:将Tris60度下溶于23的甲醇溶液,然后加入Tris质量1%的活性炭,50度保温半小时后趁热过滤,将滤液在80度下减压浓缩结晶,分离结晶后用无水酒精淋洗,干燥后既可得高纯度的氨丁三醇Tris试剂。

 

Tris的提纯与生物学应用

Tris用于生物缓冲液

在生物化学实验中,Tris是继磷酸盐缓冲液之后应用最普遍的缓冲液,通常搭配酸一起使用,来维持反应体系的pH值,常见的有Tris盐酸缓冲液、Tris醋酸缓冲液,还能与甘氨酸、硼酸、苹果酸等组合成缓冲体系。体外诊断的大部分检测中都有酶的参与,需要合适的pH才能发挥酶的催化作用。过去应用较多的是磷酸盐缓冲液,不过在含有钙、镁等金属离子的体系中,磷酸盐会生成沉淀,这时用Tris缓冲液则不会生成沉淀。

Tris用于蛋白质纯化

Tris是蛋白质的良好溶剂,而且可以维持蛋白质适宜的pH值,保持蛋白质的空间结构不改变,防止蛋白变性。蛋白质组学即从蛋白质组的水平进一步认识生命活动的机理和疾病发生的分子机制,而在蛋白质组学的研究中,蛋白质的提取是最基础也最关键的环节之一,Tris是蛋白质提取中常用的试剂

另外,Tris还可以用于核酸DNA的电泳实验,DNA琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳中的电泳缓冲液都是Tris缓冲体系,如TAETBE甚至TPE德晟Tris的生产厂家,有着成熟的Tris生产与提纯技术,可提供工业级和分析纯的试剂。

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

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