三羟甲基氨基甲烷制备Bis-Tris

三羟甲基氨基甲烷Tris是一种重要的生化原料，应用非常广泛，其中之一便是作为生物缓冲剂，比如Tris buffer、Tris-HCl、TAE电泳液、Bis-Tris等，本文介绍用Tris制备Bis-Tris（二羟乙基氨基三羟甲基甲烷）的方法。

Tris制备Bis-Tris的方法：

1.取5克亚硫酸氢钠用10毫升水稀释后配制成亚硫酸氢钠溶液，放入500毫升三口烧瓶中，然后将50毫升无水乙醇加入三口烧瓶中进行混合，再将环氧乙烷气体通入三口烧瓶内，使含有亚硫酸氢钠的醇溶液充分吸收使之成为饱和环氧乙烷水溶液，并使饱和度溶液不得低于8％，一般保持在8％-20％之间； 

生物缓冲剂原料

2.取三口烧瓶备用，取步骤1中制得的环氧乙烷饱和溶液100毫升放入此三口烧瓶，加热至30-35度，再取60克TRIS倒入此环氧乙烷饱和溶液中，使之慢慢溶清；反应2小时后，取氢氧化钠20克和20毫升水调和后滴入装有上述溶液的三口烧瓶中，使溶液的PH值始终控制在9.5-10.0之间，并持续反应6-8小时； 

3.将步骤2中反应结束后的溶液进行真空脱水、热过滤后，加入无水乙醇进行分散、降温等待产品析出，即可得到白色粉末状的Bis-Tris。制得 的Bis-Tris分子式为C8H19NO5，相对分子量为209.2。

Bis-Tris可微量电离氢离子，具有弱酸性，适于弱酸性缓冲体系，由于在Tris中引入了两个羟乙基提供孤对电子的原子较多，对部分金属离子有络合能力，与EDTA或Bicine类似。

除了Bis-Tris是用三羟甲基氨基甲烷Tris合成的之外，生物缓冲剂TAPS也是用Tris与丙磺酸内酯合成的，相当于Tris丙磺酸。德晟是诊断试剂原料厂家，可提供多种生物缓冲剂，包括Tris、Tris-HCl、Bis-Tris、Bicine、TAPS等多种试剂。