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PEP测定血清碳酸氢根

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PEP测定血清碳酸氢根

2021/06/16 13:30
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PEP全称为磷酸烯醇丙酮酸三环己铵盐(环己胺盐),可用于血气分析中二氧化碳的测定以及血清碳酸氢根的测定,通常与pH测定同时进行,用于代谢性和呼吸性的酸中毒的诊断。

磷酸烯醇丙酮酸三环己铵盐PEP

PEP测定碳酸氢根原理

磷酸烯醇式丙酮酸是植物叶绿体光合作用中的重要物质,与二氧化碳反应固定碳并最终生成糖且放出氧气。它与二氧化碳的反应及其灵敏,因此检测中用它的铵盐来检测血清中微量的二氧化碳或碳酸氢根(二氧化碳溶于水生成碳酸氢根)。PEP与碳酸氢根在PEPC与镁离子的催化下生成草酰乙酸与磷酸二氢根,然后在MDH催化下草酰乙酸与NADH+H+反应生成苹果酸与NAD+,然后检测波长405nm处的吸光度变化即可分析出碳酸氢根含量。

PEP测定碳酸氢根实验试剂

采血:体检对象空腹12小时,不饮酒24小时后采集血样,抽血前应有两周正常状况,孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验,是否有服用影响药物及采血季节作相关记录。除卧床病人外尽量取坐位采血,静坐5分钟后肘静脉,止血带使用时间不超过1分钟,穿刺成功后即刻松开。

血液样本:血浆采用肝素(或EDTA二钾)作抗凝剂,血清或血浆室温防止30-45分钟后上机离心,2小时内完成检测,否则将离心管样本加盖2-8摄氏度保存。

缓冲剂:采用pH=6.525mmol/LTris缓冲液。

底物:磷酸烯醇丙酮酸PEP 6.3mmol/LNADH(还原型辅酶Ⅰ,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)0.45mmol/L

酶制剂:磷酸烯醇丙酮酸羧化酶PEPC 200U/L+镁离子试剂8.0mmol/L,苹果酸脱氢酶MDH至少600U/L

PEP测定血清碳酸氢根可以参考灵敏度:二氧化碳浓度为25mmol/L时,吸光度为1.3625~1.4750;结果参考值20.0~29.0mmol/L。德晟是体外诊断试剂原料厂家,可生产供应PEP以及酶制剂、缓冲剂或者其它种类底物,大家可购买试剂检测也可以直接用成套的二氧化碳试剂盒检测。

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