使用TRIS进行RNA实验的缓冲液配方

发布时间:

2021-09-09


三(羟甲基)氨基甲烷 TRIS)缓冲液是一种生物试剂,是生物制剂和医药制剂中常用的缓冲液。常用于:凝胶电泳缓冲液,如TAETBELaemmli 缓冲液的制备;与甘氨酸和SDS一起制备运行缓冲液和上样缓冲液;阴离子交换色谱中的结合缓冲液和洗脱液;RNA 杂交和 DNA 切割。下面我们将向您介绍TRIS RNA实验的缓冲液配方。

1. RNA 连接酶缓冲液(10×)

试剂

数量(1.0 mL

终浓度(10×

Tris-HCl (1M, pH 8.0)

500 微升

0.5中号

氯化镁2 (1 M)

150 微升

0.15中号

二硫苏糖醇 (DTT) (0.5 M)

66 µL

33毫米

H 2 O

284 微升

 

 

2.RNA 连接酶缓冲液(2×)

试剂

数量(1 .0 mL

终浓度(

ATP (100 毫米)

10 微升

1毫米

Tris-HCl (1 M, pH 8.0)

200 微升

200毫米

氯化镁2 (1 M)

20 微升

20 毫米

DTT (1 M)

6.6 微升

6.6 毫米

DMSO

200 微升

20% (v/v)

甘油(超纯)

300 微升

30% (v/v)

H 2 O

1 毫升

——

 

3. 酵母 RNA 裂解缓冲液

试剂

数量(100毫升)

最终浓度

Tris-HCl (1 M, pH 6.8)

5 毫升

50 毫米

氯化钠 (1 M)

10 毫升

100 毫米

EDTA0.5 MpH 8.0

2 毫升

10 毫米

ddH 2 O

100 毫升

——

 

4. RNA转录缓冲液

试剂

添加金额

最终浓度

氯化镁2 (1 M)

300 微升

30 毫米

氯化钠 (5 M)

100 微升

50 毫米

亚精胺 (1 M)

100 微升

10 毫米

Tris- H Cl (1 M) (pH 7.9)

2 毫升

200毫米

H 2 O,无核酸酶

7.6 毫升

 

5. RNA聚合酶转录缓冲液(

试剂

数量(10毫升)

最终浓度

Tris-HCl (1 M, pH 8.0)

2 毫升

200毫米

氯化镁2 (1 M)

400 微升

40 毫米

氯化钠 (5 M)

0.5 毫升

250 毫米

亚精胺 (100 mM)

1 毫升

10 毫米

H 2 O

6.1 毫升

——

 

6. RNA 结合洗涤缓冲液:

1× Tris 缓冲盐水 (TBS)

0.05% 吐温 20

2 mM MgCl2(无 RNase

阻塞缓冲区:

10 mM TrispH 7.5,无 RNase

137 mM NaCl(无 RNase

3 mM KCl(无 RNase

2 mM MgCl2(无 RNase

2% 牛血清白蛋白 (BSA)

10 µg/mL 单链 DNA

10 µg/mL 酵母 tRNA

结合除 ssDNA 和酵母 tRNA 之外的所有成分。

在使用TRIS时,需要注意的是Tris缓冲液的pH值受温度和浓度的影响很大,因此在制备过程中要考虑环境,德晟专业的TRIS生产厂家,已经与众多厂家达成了长期合作关系,欢迎前来订购咨询。

 

三(羟甲基)氨基甲烷,TRIS生产厂家