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吖啶酯发光试剂如何标记核酸

发布时间：

2021-09-30

吖啶酯是化学发光免疫分析中重要的发光标记物，可用于蛋白、抗体以及核酸的检测，对这些物质进行标记，从而进行蛋白、抗体及核酸的检测。其中核酸的标记与蛋白的标记有一定的差异，本文介绍吖啶酯如何标记核酸。

标记核酸的吖啶酯

以德晟的吖啶酯发光试剂为例，目前开发有6种型号的吖啶酯，其中含N-羟基琥珀酰亚胺基团（NHS酯）的通常是用于蛋白的标记的，而标记核酸的可以用吖啶酰肼NSP-SA-ADH，这种吖啶酯末端适用直接偶联标记含核酸中的醛基，当然它也可以标记有醛基的多糖，核酸或者蛋白质等。

吖啶酯标记核酸的意义

将吖啶酯化学发光试剂标记DNA链可以制造出化学发光DNA探针，用于体外诊断。核酸包括DNA和RNA两种，许多疾病如癌症和遗传疾病的发生都与DNA的突变有关，另外对病毒特定序列DNA的分析有利于疫情的控制。

吖啶酯标记核酸方法

吖啶酯标记的核酸制成的DNA探针特异性强、灵敏度高，是核酸杂交分析成功的关键。首先分别对DNA探针5’端、3’端进行保护；然后进行吖啶酯标记，最后HPLC纯化分离DNA。其中吖啶酯标记最为关键，将25mM 吖啶酯溶解于二甲基亚砜（DMSO）中，配置1M HEPES缓冲液(PH＝8.0)，按照摩尔比核酸探针：吖啶酯＝1:5的条件，加入到HEPES缓冲液中，37℃温度下反应1h。