新型Trinder's试剂TOPS测定脂肪酸的方法
发布时间:
2021-12-09
新型Trinder's试剂是生化实验中一类起标记指示作用的色原底物,通过显色或特征吸收波长的改变来进行物质含量的检测,通常用于酶光度法生化指标检测,例如血糖、血脂、尿酸等等,这里介绍TOPS试剂测定脂肪酸的方法。
新型Trinder’s试剂种类
这一类试剂其实有十种,常见的有TOOS、TOPS、ADPS、ALPS、HDAOS、MAOS等,他们都是苯胺衍生物的磺酸钠盐,比传统的Trinder’s色原有着更好的水溶性和稳定性。德晟这边已经研发上市的有除TODB之外的9种色原底物,另外还研发有DA64与DA67两种色原,实际上与以上几种色原在原理上是比较类似的。
TOPS测定脂肪酸的优势
目前市场有很多种色原,比如ELISA里面的TMB就是适用性更广泛的色原,不过在某些指标的检测上,新型Tridner’s试剂有着更高的灵敏度和准确性。用TOPS试剂测定血清游离脂肪酸就是一种灵敏度比较高的检测方法,而且操作简单便捷。以TOPS作为色原底物检测血清或血浆FFA的方法精确度高、测量误差小,而且在众多Trinder’s色原中受乙酰CoA小、稳定性高、摩尔吸光系数大几项标准中蕞合适的色原。
TOPS测定脂肪酸所需试剂
该检测方法所需的试剂:首先就是缓冲液,一般是HEPES缓冲液,然后依次加入ATP、辅酶A、4-氨基安替比林、离子激活剂(氯化镁)、稳定剂(BSA)、防腐剂,加入适量水后加入表面活性剂,用浓盐酸调节PH到pH6-9,最后加入酰基辅酶A合成酶,然后搅拌过滤,所得滤液中再加入蒸馏水到定量得试剂A 。试剂B包括色原TOPS、水、表面活性剂,调节PH到pH6-9,最后加入HRP和乙酰CoA氧化酶,测量时与A均匀混合孵育即可。
色原底物除了TOPS之外,德晟生产的还有TOOS、MAOS、ADPS等,适合血糖等其它生化指标检测,在量产之后,成本和价格方面也有明显幅度的降低,具有明显优势。
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