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生物缓冲剂HEPES、MOPS在冷冻保存中的应用

发布时间：

2022-04-26

“冷冻保存”是生物领域中最常见的过程。在细胞培养过程中，有时需要将细胞储存起来以供后续研究或用于细胞治疗，这样可以为患者保存更多的细胞。在冷冻过程中，冷冻引起的不稳定变化对细胞产生不同的影响。如果操作不慎，极有可能导致细胞在冷冻过程中不经意间坏死而达不到要求。因此，科学家们对此非常重视，必须针对不同细胞系的样本进行不同的溶液配方研究，以创造最佳结果。

延续上一阶段的细胞治疗，本阶段将介绍细胞冷冻保存时的相关注意事项：由于体外保存细胞需要极高的稳定性和严格的生存环境要求，为了使细胞能够长期保存，冷冻保存技术用于将细胞储存在液氮中，使细胞代谢反应进入静止期。一次再解冻一次。在冻融过程中，培养基会遇到结晶、溶质沉淀、极性变化、pH变化、浓度变化等问题。在这里，我们将提供结晶、浓度变化和 pH 变化的解决方案。

解决此类问题，目前有两种方法：慢速冷冻法和玻璃化冷冻法，通过慢速冷冻，让细胞内的水分子有足够的时间排出，并加入冷冻保存剂，防止细胞内外的水分子形成太大的冰晶，使它们尽可能完全脱水。玻璃化冷冻：培养基中加入较高浓度的冷冻保存剂，利用快速冷冻的方法，在短时间内快速置换细胞内的水分，使细胞内的液体变成高粘度、高浓度的玻璃化物质，减少冰晶。

HEPES：

将 Na-P (20 – 100 mM) 与 50 mM HEPES 溶液混合的结果；在预期的浓度范围内没有观察到重大的酸度变化。在文献中，分别使用 5mM 和 50 mM 两种 Na-P 浓度来比较不同的 HEPES 浓度（0~30 mmol L-1）（图 3），与不含 Na-P 的样品（图 2）相比。 H2 -值非常明显。

MOPS：

在 20 mM MOPS 和 50 mM Na-P 的混合结果中，H2- 值增加到（7.49 ± 0.0503），酸度变化相对稳定。

MES：

为了尽量减少 pH 值的变化，所需的 MES 浓度在 5 mM Na-P 中约为 12 mM，在 50 mM Na-P 中约为 80 mM。

生物缓冲液的选择是生物制药生产过程中的关键步骤。理想的缓冲剂可以减少生物制剂在整个制造和储存过程中的降解。德晟生产高品质的 HEPES、MOPS、MES。此外，我们还可以根据您的应用提供特殊的检测服务，如生物负载、内毒素、重金属、DNase/RNase/蛋白酶活性检测等。无论如何，德晟都是您购买生物缓冲液的较好选择！