GOOD’S缓冲剂tris hcl(1185-53-1)的浓度用多少?
发布时间:
2023-10-31
GOOD'S缓冲剂Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷盐酸盐)是分子生物学实验中常用的缓冲剂之一。它能够在一定的pH范围内稳定维持溶液的酸碱度,保证实验的准确和稳定。然而,不同的实验要求可能需要不同浓度的Tris-HCl缓冲液,有人不清楚它不同的浓度是如何配制出来的?下面我们一起来探讨一下如何确定Tris-HCl缓冲液的较佳浓度,并提供一些常用浓度的配置方法。
一、为何需要不同浓度的Tris-HCl缓冲液?
Tris-HCl缓冲液适用于许多生物化学和分子生物学实验,如酶活性、制备化合物氨基酸、核苷酸、蛋白质电泳等。它的主要作用是在一定pH范围内保持溶液的酸碱度,从而维持反应的稳定性。这些不同的实验一般需要不同的pH条件和缓冲能力,如部分实验需要较高浓度的Tris-HCl缓冲液在反应中保持稳定,而其它一些实验则可能需要较低浓度的Tris-HCl缓冲液,以避免影响反应中其他关键组分,所以对于各类实验来说确定Tris-HCl的理想浓度是关键。
二、确定Tris-HCl的理想浓度
确定Tris-HCl的理想浓度通常需要进行一系列实验,以下是一种常见的实验设计:
- 确定所需pH值:首先确定实验所需的pH范围,Tris-HCl在不同pH下具有不同的缓冲能力,因此您需要知道实验在哪个pH值下运行较稳定。
- 初步浓度测试:使用已知浓度的Tris-HCl缓冲液(通常为1 M)来测试不同浓度的Tris-HCl,通常是1×、0.5×、0.1×等,您可以通过稀释1 M Tris-HCl来获得这些不同浓度。
3、调整pH值:将不同浓度的Tris-HCl缓冲液分别调至所需的pH值,可以使用浓盐酸(HCl)来调整。
4、测试缓冲性能:使用不同浓度的Tris-HCl缓冲液进行一系列实验,并分别测量它们的缓冲性能,其中包含测定它们在所需pH下的缓冲能力和溶液的稳定性。
5、选择较佳浓度:根据实验结果选择理想的Tris-HCl缓冲液浓度,以获得优越的缓冲性能。
三、Tris-HCl缓冲液的配置方法
一旦确定了Tris-HCl缓冲液的浓度,可以使用以下方法来配置不同浓度的Tris-HCl缓冲液:
1 M Tris-HCl(pH 7.4,7.6,8.0):
(1)称量121.1克Tris粉末,置于1升容器中。
(2)加入约800毫升去离子水,并充分搅拌溶解。
(3)使用浓盐酸(HCl)根据所需的pH值(7.4、7.6、或8.0)加入适量的HCl来调整pH。
(4)将溶液定容至1升。
(5)经高温高压灭菌后,在室温下保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值会随温度变化而变化,每升高1℃,溶液的pH值大约会降低0.03。
1.5 M Tris-HCl(pH 8.8):
(1)称量181.7克Tris粉末,置于1升容器中。
(2)加入约800毫升去离子水,并充分搅拌以溶解。
(3)使用浓盐酸(HCl)调节pH值至8.8。
(4)将溶液定容至1升。
(5)经高温高压灭菌后,在室温下保存。
注意:同样应使溶液冷却至室温后再调定pH值。
0×TE缓冲液(pH 7.4,7.6,8.0):
这种缓冲液常用于分子生物学实验,用于DNA的溶解等。
(1)准备以下溶液,置于1升容器中:100 mM Tris-HCl Buffer(pH 7.4、7.6、或8.0) 100毫升、500 mM EDTA(pH 8.0) 20毫升
(2)向容器中加入约800毫升去离子水,均匀混合。
(3)将溶液定容至1升后,高温高压灭菌。
(4)室温下保存。
GOOD'S缓冲剂Tris-HCl是分子生物学实验的关键组成部分,但其浓度需要根据实验要求的pH范围和缓冲能力来确定。德晟作为生物缓冲剂的优势生产厂家,它可以提供Tris-HCl原料粉末,供厂家自行即配即用,方便运输,保存和转移。同时具备独立仓库,供货稳定,如果您有意向,欢迎随时咨询我们!
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