色原底物新型Trinder's试剂和ELISA试剂盒中的TMB的区别
发布时间：
2019-07-02
我们都知道，现在使用Trinder’s显色试剂和ELISA试剂盒中的TMBZ作为色原都非常普遍。那么它们有什么区别呢？
首先色原新型Trinder’s试剂跟传统的Trinder’s 试剂有类似的地方，以N-乙基-N-（3-磺丙基）-3-甲氧基苯胺钠盐ADPS为例，在有或氧化氢和POD存在下与4-AA（4-氨基安替吡啉）反应，苯胺的N变成C=N双键，对位上与4-AA的氨基结合成C=N双键，从而构成一种醌亚胺结构，跟对苯醌的C=O双键类似，吸收波长都在可见光区域，从而产生显色反应。所以这里的反应必须引入4-AA（或者MBTH）参与。
ELISA试剂盒联酶免疫吸附测定的原理是：用特异性抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的抗原会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的特异性抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。生物素化的特异性抗体与结合在包被抗体上的抗原结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物TMB(TMBZ)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，抗原浓度与OD值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中抗原的浓度。它无需像色原ADPS、TOOS、MAOS等这些，需要引入另一种化合物（如4-AA，MBTH）来做颜色反应，但TMBZ需要在酸性条件（HCl)下作颜色反应，限制了它的应用。
不管是运用新型Trinder’s试剂的酶法（酶光度法）还是以TMB（TMBZ）为色原的ELISA试剂盒，其原理都是类似的。主要还是看不同类型的检测用不同的试剂盒，对于同一待测物也有不同的检测方法。
德晟科技自05年就开始研发生产血液检测体外诊断方面试剂，对色原底物新型Trinder's试剂有着较深的研究。
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