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蛋白质的PVDF转膜缓冲剂CAPS

发布时间：

2019-07-26

3-（环己胺）-1-丙磺酸CAPS是一种应用广泛的缓冲剂，也叫N-环己基-3-氨基丙磺酸。很多生物试验以及生化试剂盒里都会用到。

现在蛋白质的PVDF转膜已经不用Tris-gly、SDS、20%甲醇缓冲液，因为缓冲液中有甘氨酸，所以测序的时候很难区分甘氨酸是Buffer带进去还是蛋白质本身的，现在测序用的转膜缓冲液是10mM/1CAPS10%甲醇，CAPS电印记缓冲液中的甲醇浓度范围是0~20%，一般甲醇浓度高的缓冲液对低分子量蛋白质的转移效果好，而甲醇浓度低甚至不含甲醇的缓冲液则有利于高分子量蛋白的转移。

转膜操作时，要准备好电转槽，电泳仪，0.45um（适用于20KD以上蛋白）及0.22um（适用于20KD以下蛋白）孔径的PVDF膜，切成略大于凝胶大小，两张Whatman 3MM 滤纸，切成与凝胶大小，甲醇（100%），DD水。CAPS电印迹缓冲液（母液）要用去离子水溶解，用2mol/L NaOH 将pH值调至11.0，然后定容至，贮存于4ºC。 CAPS电印迹缓冲液（工作液，含10％甲醇的1×CAPS，临用前混合）染色液0.1％考马斯亮蓝G-250 40％甲醇/1％乙酸，脱色液50%甲醇。

德晟科技自05年就开始研发生产血液检测体外诊断方面试剂，对色原底物新型Trinder's试剂、生物缓冲剂及化学发光试剂有着较深的研究。

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