在不同实验中HEPES缓冲液的配制
发布时间：
2019-10-15
HEPES即4-羟乙基哌嗪乙磺酸，是一种常用的生物缓冲剂，常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒、PCR诊断试剂盒中。其具有很多优点，对细胞无毒性作用，是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。pH值缓冲范围：6.8-8.2。使用终浓度为10-50mmol/L，一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。
根据实验的不同，HEPES buffer缓冲液的配制方法也有差异。通常有HEPES配合氢氧化钠NaOH，HEPES+盐。配制HEPES的Stock solution 时，先讲HEPES 称重溶于蒸馏水，然后用0.5-1M的NaOH调节pH，需注意有效的pH缓冲范围是6.8-8.2，然后蒸馏水定容，4℃保存。
配制HEPES缓冲盐溶液时，则需加入氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、葡聚糖等，同样用NaOH来调节pH，最后定容低温保存。在细胞-细胞黏附实验中常用的溶液Leagene HEPES缓冲液，主要由HEPES、氯化钠、氯化钾、磷酸盐、葡萄糖等组成，并含Ca2+、Mg2+离子，pH7.4，经过滤除菌处理。常用于长期聚集培养过程中清洗组织或细胞(尤其是胚胎细胞)，以便保护细胞的钙黏素，同时不影响细胞聚集的形成。不含钙镁离子的HEPES-BSA溶液，简称为HA溶液，属于细胞培养液的成分之一，含部分其他盐离子，经过滤除菌处理，多适用于组织细胞原代培养中的清洗、培养。
德晟科技自05年就开始研发生产分离胶、肝素、EDTA钾盐等采血管添加剂，以及体外诊断方面试剂，对色原底物TOOS、MAOS等新型Trinder's试剂、Bicine、Tris等生物缓冲剂及鲁米诺、吖啶酯等化学发光试剂有着较深的研究，在自主研发及合成方面具有专业优势。
生化试剂,缓冲剂,HEPES试剂,羟乙基哌嗪乙磺酸
相关新闻
