Bicine、EPPS等生物缓冲液的配制方法
发布时间：
2019-11-13
在生化实验或检测中，几乎所有的反应都需要控制在一定的pH范围，尤其是有酶参与的反应，pH的改变对反应的影响就更大，因此用生物缓冲剂来维持反应环境的pH值。在生化实验中，很多都是模拟生物体内的检测反应，这个对pH的要求也是很高的，生物体内是通过体液调节，实验中就需要用到生物缓冲剂了。
生物缓冲剂的种类很多，配制方法也有些许差异，不过大体上的原理都是类似的，通常是在共轭酸中加入氢氧化钠或者在共轭碱中加入盐酸，两种方法都可组成有足够浓度的共轭酸碱对的缓冲溶液。这里介绍配制少量（约1-2L）双羟乙基甘氨酸Bicine或羟乙基哌嗪丙磺酸EPPS的配制方法：
Bicine缓冲液 的配制方法
(1)配0.1M溶液(A): Bicine 16.317g/去离子水 1,000ml
(2)配0.1M NaOH溶液(B):NaOH 4g/去离子水 1,000ml
(3)pH 5.1 1,000ml(A)+0ml(B) (A):(B)=5:0
pH 7.8 1,000ml(A)+200ml(B) (A):(B)=5:1
pH 8.2 1,000ml(A)+400ml(B) (A):(B)=5:2
pH 8.6 1,000ml(A)+600ml(B) (A):(B)=5:3
pH 10.4 1,000ml(A)+800ml(B) (A):(B)=5:4
EPPS缓冲液的配制方法
(1)配0.1M溶液(A): EPPS 25.233g/去离子水 1,000ml
(2)配0.1M NaOH溶液(B):NaOH 4g/去离子水 1,000ml
(3)pH 5.2 1,000ml(A)+0ml(B) (A):(B)=5:0
pH 7.3 1,000ml(A)+200ml(B) (A):(B)=5:1
pH 7.8 1,000ml(A)+400ml(B) (A):(B)=5:2
pH 8.2 1,000ml(A)+600ml(B) (A):(B)=5:3
pH 8.8 1,000ml(A)+800ml(B) (A):(B)=5:4
需要注意的是：配制温度控制在20度，如果需要比较准确的pH值，可以用pH计测量，然后微调A溶液和B溶液的比例，调整至特定的pH值；如果检测环境需要排除钠离子，用氢氧化钾代替氢氧化钠也是可以的，按对应的分子量改变称量的质量即可。
德晟科技自05年就开始研发生产分离胶、肝素、EDTA钾盐等采血管添加剂，以及体外诊断方面试剂，对色原底物TOOS、MAOS等新型Trinder's试剂、Bicine、Tris等生物缓冲剂及鲁米诺、吖啶酯等化学发光试剂有着较深的研究，在自主研发及合成方面具有专业优势。
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