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色原底物HDAOS在检测总胆固醇试剂盒中的应用

发布时间：

2019-11-27

总胆固醇的测定方法超过上百种，可分为化学试剂比色法、酶分析法、荧光法、气相和高效液相色谱法等五大类。由于气相和高效液相色谱法条件高，采用色原底物如HDAOS的酶法测定总胆固醇是目前最常规应用方法，其优点是快速准确、专一性强、样本用量少、不需抽提，便于自动化分析和批量测定。

胆固醇又称胆甾醇。一种环戊烷多氢菲的衍生物。血清中总胆固醇(total cholesterol，TC)包括游离胆固醇(free cholesterol，FC)和胆固醇酯(cholesterol ester，CE)两部分。血清中胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸(FFA)，胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成4-胆甾烯酮和过氧化氢。生成的过氧化氢在3-AAP和色原底物HDAOS以及过氧化物酶存在时，可生成红色醌亚胺类物质，用分光光度计检测颜色深浅，颜色深浅与检测对象中TC含量成正比。

检测总胆固醇需要准备的试剂有：pH6.7的Good’s缓冲剂50mmol/L，胆固醇酯酶 ≥200U/L，胆固醇氧化酶 ≥100U/L，过氧化物酶 ≥3000U/L，4-AAP 0.3mmol/L，HDAOS 5mmol/L，还要胆固醇标准溶液大约5mmoL/L。血清TC浓度等于测定管与标准吸光度比值乘以胆固醇标准溶液的浓度。