生物缓冲剂Tris在核酸凝胶电泳中的应用
发布时间：
2020-06-06
三羟甲基氨基甲烷Tris是生物化学领域应用很广泛的一种缓冲剂，cas号77-86-1，具有性质稳定不参与生化过程、缓冲能力强等优点，被广泛用于蛋白质和核酸相关的检验。
由于Tris的用量很大很广泛，一些细节也需要注意，Tris缓冲液虽然缓冲能力强，但稀释过大或者反应体系体积变化大的时候，需要慎重使用Tris，稀释十倍的话篇pH变化大于0.1，磷酸盐缓冲液则pH变化小于0.1。
Tris通常被用于核酸DNA或RNA的琼脂糖凝胶电泳中的缓冲液，通常用的缓冲体系有TAE、TBE、TPE等，即生物缓冲剂Tris配合EDTA以及醋酸、硼酸、磷酸等配制成的缓冲溶液。不同公司使用的缓冲液有所差异，相对来说使用磷酸的TPE较少，主要是使用TAE和TBE缓冲液。
在做核酸琼脂糖凝胶电泳时，首先的准备工作就是制备凝胶，琼脂糖凝胶做的好坏直接影响电泳效果和效率。这个制作过程耗时较长，节约时间考虑也可以直接购买制备好的预制凝胶。
TAE琼脂糖核酸电泳凝胶
电泳液制备好后，就可以放到电泳槽中，开始点样，然后开电源开始电泳，使用TAE/TBE使，一般需要20-30分钟完成电泳，电压建议不超过200V，TAE相对来说比TBE电泳液电压可以高一些。电压越高，电泳速率越快，不过相应的分辨率也会低一些。
TBE的电导率大于TAE的电导率。因此相比于TAE，TBE不太会导致电泳槽内过热的情况发生，长时间电泳建议使用TBE。硼酸是酶的抑制剂，因此如果你需要分离电泳的DNA用于酶切反应，建议使用TAE作为电泳缓冲溶液。TAE对于较长片段的分离效果更好,TBE适用于小于300bp的片段。TAE更适用于回收DNA片段。
Tris跟bicine一样是德晟侧重研发生产的一款生物缓冲剂，此外，对与之关联的EDTA、病毒保存液、病毒运输介质、核酸提取液也有丰富的生产经验，欢迎广大合作伙伴咨询探讨。
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