采样管拭子保存液与核酸检测的关系
发布时间:
2020-06-22
拭子保存液就是指的病毒保存液,分为灭活型和非灭活型,是病毒采样管内保护采样后的病毒拭子头部的一种溶液,可以防止拭子在病毒采样后不能立即检测的情况下也可以保存或运输一段时间,防止病毒核酸分解而检测不出来。
整个病毒核酸的检测步骤很多,其中用鼻咽拭子或其它拭子采样以及病毒样本的保存、运输是核酸检测的前处理环节。拭子是比较常用的生物样品取材方法,可以用于PCR、核酸检测等分子生物学分析。拭子取样的特点是快捷和非介入性,不会对取样的对象造成伤害或者其它影响,适合大规模的筛查取样和特殊群体(比如儿童、老人)和组织器官的取样。
不同类型病毒保存液
由于大部分病毒取样的地方都不具有立即检测的条件,所以要对病毒进行保存及运输送检就至关重要,而病毒在体外又很难存活,所以就需要用病毒保存液把采样管内的病毒样本浸泡起来。其中灭活型的病毒保存液更安全,常规的低温保存就行,非灭活型保存液保存的样品保存时间更短或者需要严格低温保存,但是检出率更高,而且不只是能用于核酸检测。不过需要注意的是采样管内并不是保存液越多越保存的好,因为病毒保存液是溶液,会对病毒样本产生一个稀释的作用,加的过多反而会降低核酸检测的检出率。
病毒样本送达检测机构后,经过裂解液裂解、离心、分离等过程进行核酸纯化,提取DNA或RNA时要注意防止核酸的裂解。RNA样本还需要通过逆转录引物、dNTPs、逆转录酶等进行逆转录反应,生产对应的DNA。然后在DNA聚合酶催化下用病毒的cDNA的特异性引物进行PCR扩增。若有扩增出定都的DNA条带则可以判定样本含病毒,反之则没有。
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