TRIS试剂在电泳缓冲液中的配置及应用你get到了吗
发布时间：
2020-10-24
电泳缓冲液是核酸、蛋白质凝胶电泳系统的一个重要组成，是电泳场中的导体，也是维持电泳系统恒定 pH值的必要条件。它是指在进行分子电泳时所使用的缓冲溶液，用以稳定体系酸碱度。常见的核酸电泳缓冲液有：TAE、TBE、TPE等，它们有一个共同点，那就是里面都含有TRIS和EDTA。加入EDTA的目的是螯合Mg2+等离子，防止电泳时激活DNA酶，此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀，下面来介绍下TAE及TBE具体的配置方法和应用。
1.TAE的配置及应用
TAE是使用最广泛的缓冲系统。TAE其实就是Tris+乙酸+EDTA-K2，其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量（TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量），且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种（TAE和TBE）缓冲液快约10%，电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果，此外，回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。
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50×TAE Buffer 配制方法：
1、称量Tris 242g，EDTA 18.612g于1L烧杯中；
2、向烧杯中加入约800ml去离子水，充分搅拌均匀；
3、加入57.1ml的冰乙酸，充分溶解；
4、用NaOH调pH至8.3，加去离子水定容至1L后，室温保存。
使用时稀释50倍或100倍 即1×TAE Buffer 或 0.5×TAE。
2.TBE的配置及应用
TBE是一种PCR技术中用到的缓冲液，TBE其实就是Tris+硼酸+EDTA-K2，
TBE配置方法：
- 使用液（0.5×）0.045mol/L Tris-硼酸 0.001mol/L EDTA 采用无菌水溶解混匀，溶液体积为1L。
2、浓贮存液（5×）TRIS27.5g,硼酸 20ml ,0.5mol/L EDTA 采用无菌水溶解混匀，NaOH调pH至8.0，溶液体积1L。
TRIS作为德晟的核心产品之一，其配置而成的缓冲系统具备较强的缓冲能力，能使溶液两极的pH保持基本不变。还能使溶液具有一定的导电性，以利于DNA分子的迁移，目前德晟的TRIS已经销往全国各地，产品品质及服务得到了客户的充分认可，想找靠谱的TRIS生产商，来德晟不会让你失望。
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