Tris、CAPS等生物缓冲剂使用浓度及注意事项
发布时间：
2020-11-14
生物缓冲剂有很多种类，比如常用的Tris、CAPS、Bicine等，这些试剂在用量多的情况都是粉末试剂，需要配制溶液。那么配溶液时是使用多少的浓度、有哪些注意事项呢？
不同的缓冲溶液应用于不同实验，其使用浓度也是不一样的。比如Tris的缓冲体系通常有：Tris-HCI Buffer，200mM，pH7.5；Tris-HCI Buffer 0.05mol/L；Tris-HCl Buffer ，1.0M；Tris-EDTA Buffer 0.01mol/L Tris，1mM EDTA，pH 7.4。CAPS的缓冲体系有CAPS Buffer 0.2mol/L、蛋白印迹10mM/1CAPS10%甲醇等。
缓冲液的使用是很广泛的，能抵抗外来少量酸碱或者反应体系中生成的酸碱，而维持体系pH值基本不变的溶液成为缓冲溶液。缓冲液通常由足够浓度和适当比例的共轭酸碱对组成（浓的强酸或强碱也有缓冲作用但因酸碱性过强很少使用）。
Tris等缓冲剂使用事项
像Tris（三羟甲基氨基甲烷）、CAPS、磷酸缓冲液等这些溶液虽然都有缓冲作用，但是这个缓冲作用是有一定范围和能力上限的。如果超过缓冲液允许pH范围或者在范围之内但是外来的酸碱的量过多，缓冲液会失去缓冲能力。
比如Tris-盐酸缓冲液，虽然是同样pH值的缓冲液，其Tris和盐酸的总浓度越大，缓冲容量也越大。缓冲溶液的pH值主要是共轭酸碱对的比例决定的，即Tris和盐酸的比例。当总浓度相同时，缓冲比越接近1它的缓冲容量越大。即总浓度相同时，Tris和盐酸1:1时缓冲容量最大。
Tris、CAPS等只有缓冲比在0.1~10范围内才具有缓冲作用，比如Tris溶于水是不具缓冲液作用的，需要加盐酸、硼酸、甘氨酸等。能发挥缓冲作用的pH范围是其解离常数pKa加减1。通常配制溶液时，Tris需要加盐酸、CAPS或Bicine需要加氢氧化钠来调节pH值。
缓冲剂的选择上还有一些其它的需要注意，比如Tris、CAPS或Bicine的使用浓度通常是0.05至0.2mol/L，但也有1M或者2M的高浓度缓冲液；使用Tris时需要考虑其与反应体系发生作用或与金属离子络合等，药用的缓冲液还必须考虑是否具有毒性等。
上述是生物缓冲剂基本的注意事项，需要了解更多缓冲剂种类的问题可以咨询德晟厂家。缓冲液配制直接按计算比例配制，要求精确配制用pH计测量校正即可。
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