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Trinder's试剂等酶的不同底物的检测波长代表的含义

发布时间：

2022-02-01

在生化诊断中，酶联免疫分析所使用的底物是测定待测指标的关键因素，往往决定了检测的准确性和灵敏度。Trinder's试剂、NADP、PNPG等底物反应生成有色产物后，通过检测产物最大吸收波长处的光吸收即可达到测定的目的。

对于不同的底物，其显色产物的最大吸收波长是不同的，如果待测样本比较复杂，其中某种成分与检测的波长相近的话，就比较容易造成干扰，这需要对底物反应后的最大吸收波长有所了解。

Trinder's试剂等酶的不同底物的检测波长

不同底物的检测波长：

NADH和NADPH在340nm有特征性吸收峰，而NAD+和NADP+在340nm有特征性吸收峰，而NAD+和NADP+在340nm无特征性吸收峰，利用其偶联的脱氢酶(工具酶)反应，根据340nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。对应的酶有谷氨酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、类固醇脱氢酶等。
Trinder's试剂在过氧化物酶的作用下，可与4-AA、MBTH耦联生成有色产物，产物的最大吸收波长及设置的检测波长比较高，像ADPS、ADOS、TOOS、ALPS在540-560nm，DAOS、HDAOS则为590nm左右，比较高的是MAOS与MADB，达到了630nm。ELISA试剂盒中常用的TMB为450nm，比Trinder's试剂要低许多。
其它的色原如p-NP磷酸对硝基苯酚、p-NA对硝基苯酚也有应用在丙氨酸转氨酶、酸性磷酸酶的检测中，p-NA在405nm有特征性吸收峰。