富马酸酮替芬的检测物“鲁米诺”
发布时间：
2021-02-10
鲁米诺又叫做发光氨，化学名为3-氨基苯二甲酰肼，常用于化学发光免疫分析生化系统中。常温下外观为黄色晶体或者米黄色粉末，是一种比较稳定的化学试剂。常用于刑侦现场的血液检测，当鲁米诺试剂喷在血液上，会与活性氧产生氧化作用，释放出蓝紫色荧光，被称为鲁米诺反应。
化学发光分析法因其具有灵敏度高、线性范围宽、仪器操作简单等优点，被广泛用于药物及生化样品的直接测定。用化学发光和电化学发光分析法测定富马酸酮替芬的研究也有报道。但是，基于高锰酸钾化学发光体系测定富马酸酮替芬的研究尚未见报道。经过试验发现，在碱性介质中，高锰酸钾可氧化鲁米诺产生发光信号，富马酸酮替芬对该发光信号有强烈的增敏作用。
为此我们进行了试验，并进行了分析得出了以下结论：
1 流动注射化学发光信号体系的流动注射化学发光信号。
在碱性介质中，高锰酸钾可以氧化鲁米诺产生化学发光，当在该反应体系中加入富马酸酮替芬后，化学发光强度明显增强。
2 化学发光光谱
两个发光体系的最大发射波长均在425 nm左右，与鲁米诺发光体的最大发射波长一致，说明两个化学发光体系的发光体均为激发态的3-氨基邻苯二甲酸根。鲁米诺-高锰酸钾-富马酸酮替芬体系的发光强度明显高于鲁米诺-高锰酸钾体系，说明富马酸酮替芬的加入增敏了鲁米诺一高锰酸钾体系的发光强度。
3 流路和流量的选择
经过试验发现，溶液的不同混合方式对发光信号有很大的影响。对选定体系的多种流路进行了比较。考察了不同流量对体系发光信号的影响。试验表明：随着流量的增加，先增大后减小，当流量达到1．9mL·min时达到最大值。试验选择各管路流量均为1．9 mL·min 。
4 氢氧化钠溶液浓度的选择
在0．02～0．3 mol·L-4．范围内，考察了氢氧化钠溶液浓度对反应体系发光强度的影响。结果表明：当氢氧化钠溶液浓度为0．05～0．15Mol·L-1时最大且基本不变，试验选择氢氧化钠溶液浓度为0．1 Mol·L-4。
5 氧化剂的选择及其浓度
试验考察了高锰酸钾、铁氰化钾、过氧化氢、高碘酸钾等不同的氧化剂对体系化学发光信号的影响。结果表明：以高锰酸钾为氧化剂时化学发光增敏信号值大且稳定。其浓度为5．0×10-4mol·L-1时。最大，故试验选择高锰酸钾溶液浓度为5．0×10-4mol·L-1。
6 鲁米诺溶液浓度的选择
鲁米诺为主要发光物质，其浓度对发光强度、检测灵敏度、线性范围具有较大的影响。试验考察了鲁米诺溶液浓度在2．0×10-4～1．0×10-4mol·L_1范围内对体系发光信号的影响，结果表明：随着鲁米诺溶液浓度增大，化学发光强度不断增大，表明鲁米诺溶液浓度不宜过大；鲁米诺溶液浓度过小时，发光信号值较小且稳定性较差。兼顾稳定性及灵敏度，试验选择鲁米诺溶液浓度为3．0×10-4mol·L-1。
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