钠、钾离子酶法测定的色原底物和检测波长

发布时间:

2021-07-29


通常我们做生化检测检测的项目比较多的是血糖检测、血脂检测、谷丙转氨酶等,但全面的检测钠、钾离子的检测也是很重要的,这两种金属离子也是人体含量最高的金属元素,需要及时补充,否则对身体健康有很大影响。

钠、钾离子的测定方法有很多种,其中比较广泛的就是酶法测定,即在特定酶的催化下与检测样本中的钠、钾离子反应,在通过色原底物或显色底物的显色反应再对应的最大吸收波长下测量光吸收,从而分析判断待测样本中钠、钾离子含量。

钠离子的酶法测定:

邻硝基苯酚-β-D-半乳糖苷(ONPG)在钠依赖性β-半乳糖苷酶催化下生成邻-硝基酚和半乳糖。邻-硝基酚的生成量和样品中钠离子浓度呈正比。邻-硝基酚在碱性环境中呈黄色,可在405nm波长处监测吸光度的升高速度,计算钠的浓度。

各种色原底物及酶制剂

 

钾离子的酶法测定:

磷酸烯醇丙酮酸(PEP)与二磷酸腺苷(ADP)在钾依赖性丙酮酸激酶(PK)催化下,生成丙酮酸和三磷酸腺苷(ATP)。再在乳酸脱氢酶(LDH)催化下,所生成的丙酮酸和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原态(还原型辅酶ⅠNADH)反应,生成乳酸和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(氧化型辅酶ⅠNAD+)。反应中NADH的消耗量与样品种钾离子浓度呈正比。因此,在340nm处监测吸光度下降速率,可以计算钾离子含量。反应式如下:

PEP + ADP K+, PK> 丙酮酸 + ATP

丙酮酸 + NADH + H+ LDH> 乳酸 + NAD+

钠、钾离子的酶法测定中,都是利用有对应金属离子依赖性的酶的催化生化反应,最终色原底物的显色产物与钠、钾离子含量成正比,用分光光度计测量显色产物的浓度即可计算钠、钾离子浓度。德晟是生产血液检测试剂、体外诊断试剂的厂家,有多种生化检测用的色原底物及酶制剂。

色原底物,德晟