羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)在生物学中的应用
发布时间:
2021-08-11
羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)是一种广泛应用的缓冲剂,其缓冲能力强大(pH6.8~8.2),受外界因素影响小,不形成缓冲剂-金属离子复合物。多被广泛用于生理、生化、药理研究中。其实,它不止这些应用,在我们生物学中也有它的踪迹。
阻断阴离子通道
HEPES是一种常用的灌流液pH稳定剂,含有155mmol/L HEPES的灌流液(简称HBM)可以阻断乙酰胆碱透导的耳蜗神经元去极化电流。10mmol/L HEPES的HBM可以对果蝇神经元的Cl-通道产生电压依赖性的阻断作用,表现为通道电流的下降。细胞膜的内面暴露于HBM中时,阻断作用尤为显著,而用不含缓冲剂的灌流液冲洗后,可以取消这种作用。HEPES对外向整流阴离子通道的阻断作用。无论是细胞膜的内面还是外面,HEPES对这种通道都有阻断作用。
影响培养细胞的生长
内皮细胞在HEPES培养液中培养时,细胞的生长受到抑制,内皮细胞可以产生O2-,而HEPES则促使O2-产生增多。过多的O2-引起内皮细胞内毒性产物如H2O2,OH-等物质增多从而使其生长受到抑制和毒害。HEPES还可以引起培养细胞RNA转录的异常。
抑制平滑肌肌力
5.0mmol/L的HBM与BBM比较,去甲肾上腺素(NE)诱导的HBM中的大鼠主动脉条收缩力明显小于BBM中的对照组肌力,而且血管条自发收缩的频率也相应变慢,将HBM换成BBM,则可完全取消这种效应。使用多种受体阻断剂,均不能去除HEPES的这种抑制效应,表明这种抑制可能不是由受体介导所致。在大鼠输精管也观察到类似的效应。
影响血液凝固时间
临床上有时将HEPES作为凝血实验中血浆样品的稳定剂。研究发现,HEPES可以缩短凝血酶原时间以及纤维蛋白聚合时间(FMP),以至于掩盖了不正常的结果。对于一些肝脏疾病(伴低纤维蛋白血症)及一些获得性低纤维蛋白血症,由于HEPES掩盖了FMP的异常,从而纠正了延长的凝血时间,致使不能正确诊断。
HEPES的其它作用
HEPES作缓冲剂的灌流液在Ach对蛙半规管神经元冲动的发放率影响实验中,在BBM中,Ach对神经元冲动发放率可产生兴奋和抑制的双向作用,而在HBM中Ach只产生抑制作用,这种作用同加入阿托品的效应一致。作者认为HEPES是哌嗪的衍生物,哌嗪有抗胆碱作用,所以HEPES可能具有M受体拮抗作用。
羟乙基哌嗪乙磺酸,HEPES