三羟甲基氨基甲烷(Tris)在DNA提取中有哪些作用?

发布时间:

2021-08-12


因为DNA 提取是一个pH敏感过程,使用tris缓冲液有助于在细胞裂解和提取过程中保持pH稳定。但具体Tris缓冲液DNA提取中又有哪些作用是我们需要去了解的。这样在DNA提取过程中,能更好的保护DNA免受pH变化的影响

Tris作为缓冲

由于pH值会影响许多细胞因素并受其影响,因此维持稳定的pH值对实验科学至关重要。三(羟甲基)氨基甲烷的pKa为8.1,是pH7和9之间的有效缓冲液。由于其中性范围,tris是生物实验室中常用的缓冲液。然而,tris缓冲液对温度敏感,应在其pH值的温度下使用,以避免不准确。

细胞裂解

裂解细胞是DNA提取的第一步。这是通过含有tris和EDTA(乙二胺四乙酸)的缓冲液完成的。由于这些离子有助于保持细胞膜的完整性,用EDTA去除它们会使细胞膜不稳定。Tris是主要的缓冲组件;它的主要作用是将缓冲液的pH值保持在一个稳定点,通常为8.0。此外,tris可能与膜中的LPS(脂多糖)相互作用,进一步破坏膜的稳定性。

Tris保护DNA免受pH变化的影响

当细胞分裂时,它们的DNA和内容物会溢出到缓冲液中。这种由细胞内含物和片段化RNA和蛋白质会对溶液的pH值产生很大影响。由于DNA对pH值敏感,因此Tris必须缓冲液使pH值保持在稳定点。

DNA沉淀

DNA提取的阶段,从溶液中提取DNA本身。此时,DNA可溶于缓冲液。为了从溶液中提取,通过加入乙醇或异丙醇(异丙醇)使DNA不溶。完成后,DNA在溶液中变得明显,呈白色丝状物质。虽然DNA可以通过这种方式从剩余的细胞成分中分离出来,但当它不溶时,它就不能使用。分离后,将酒精除去,必须将DNA放回Tris缓冲液中才能使用。

三羟甲基氨基甲烷Tris)在众多缓冲液中一直都是首当其冲的。但要真的做好Tris这个产品却是不如表面这般风淡云轻。德晟通过十几年的研发生产,才做出了让客户满意的Tris产品,而德晟要得就只是客户的认可和肯定。

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