HDAOS如何检测血清总胆固醇
发布时间：
2021-09-08
新型Trinder’s试剂是生化试剂和中常用的一类色原底物，种类很多，检测方法与ELISA试剂盒中的TMB基本类似，都属于酶催化分光光度法检测。不同的Trinder’s试剂在检测不同生化指标时有或多或少的差异，这里介绍HDAOS是如何检测血清总胆固醇水平的。
色原底物HDAOS用于生化检测
真空采血管采集样本
在用HDAOS检测血清总胆固醇之前，样本的采集和处理也是非常关键的，采集样本如出现差错，后续的检测再准确也无济于事。一般是采用真空采血管抗凝管采集静脉血，以EDTA二钾或者肝素抗凝，检测标本可为血清（或者血浆也可以）。如用抗凝血样本作检测注意采集后轻轻颠倒混匀5-8次，使样本与抗凝剂充分接触。
HDAOS检测样本中胆固醇
胆固醇又称胆甾醇。一种环戊烷多氢菲的衍生物。总胆固醇(total cholesterol，TC)包括游离胆固醇(free cholesterol，FC)和胆固醇酯(cholesterol ester，CE)。血清中胆固醇酯可被胆固醇酯酶CHE水解为游离胆固醇和游离脂肪酸(FFA)，胆固醇在胆固醇氧化酶CHO的氧化作用下生成4-胆甾烯酮和过氧化氢。有过氧化物酶催化的情况下，生成的过氧化氢使色原底物HDAOS与4-AAP耦联氧化，可生成红色醌亚胺类物质，用分光光度计检测吸光度，吸光度与对象中TC含量成正比。
用HDAOS检测胆固醇的优势
血清总胆固醇的测定方法超过上百种，可分为化学试剂比色法、酶分析法、荧光法、气相和高效液相色谱法等五大类。其中采用色原底物如HDAOS的酶法测定总胆固醇是目前最普遍的，其优点是快速准确、专一性强、样本用量少、不需抽提，便于自动化分析和批量测定（气相和高效液相色谱法条件要求高）。
色原底物HDAOS检测血清总胆固醇实验中，底物、HRP或POD以及酶制剂胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶的质量会直接影响检测结果，建议找德晟这样的厂家，批量采购相应的色原底物、酶制剂及缓冲剂也会比较实惠。
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