HDAOS如何检测血清总胆固醇

发布时间:

2021-09-08


新型Trinder’s试剂是生化试剂和中常用的一类色原底物,种类很多,检测方法与ELISA试剂盒中的TMB基本类似,都属于酶催化分光光度法检测。不同的Trinder’s试剂在检测不同生化指标时有或多或少的差异,这里介绍HDAOS是如何检测血清总胆固醇水平的。

色原底物HDAOS用于生化检测

真空采血管采集样本

在用HDAOS检测血清总胆固醇之前,样本的采集和处理也是非常关键的,采集样本如出现差错,后续的检测再准确也无济于事。一般是采用真空采血管抗凝管采集静脉血,以EDTA二钾或者肝素抗凝,检测标本可为血清(或者血浆也可以)。如用抗凝血样本作检测注意采集后轻轻颠倒混匀5-8次,使样本与抗凝剂充分接触。

HDAOS检测样本中胆固醇

胆固醇又称胆甾醇。一种环戊烷多氢菲的衍生物。总胆固醇(total cholesterol,TC)包括游离胆固醇(free cholesterol,FC)和胆固醇酯(cholesterol ester,CE)。血清中胆固醇酯可被胆固醇酯酶CHE水解为游离胆固醇和游离脂肪酸(FFA),胆固醇在胆固醇氧化酶CHO的氧化作用下生成4-胆甾烯酮和过氧化氢。有过氧化物酶催化的情况下,生成的过氧化氢使色原底物HDAOS与4-AAP耦联氧化,可生成红色醌亚胺类物质,用分光光度计检测吸光度,吸光度与对象中TC含量成正比。

用HDAOS检测胆固醇的优势

血清总胆固醇的测定方法超过上百种,可分为化学试剂比色法、酶分析法、荧光法、气相和液相色谱法等五大类。其中采用色原底物如HDAOS的酶法测定总胆固醇是目前较普遍的,其优点是快速准确、专一性强、样本用量少、不需抽提,便于自动化分析和批量测定(气相和液相色谱法条件要求高)。

色原底物HDAOS检测血清总胆固醇实验中,底物、HRP或POD以及酶制剂胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶的质量会直接影响检测结果,建议找德晟这样的厂家,批量采购相应的色原底物、酶制剂及缓冲剂也会比较实惠。

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