HEPES在小鼠胚胎培养基中的影响
发布时间：
2021-11-30
培养基中维持稳定的PH值对于优化配子和胚胎发-育很重要，稳定培养基中的PH值需要依靠生物缓冲剂来完成，HEPES是IVF培养基中比较常用的缓冲剂，但是很多人在使用时会产生担忧，担心HEPES会产生毒性从而影响整个实验，导致实验失败或出现差池。
为了解决这一疑虑，我们做了一个实验，在小白鼠胚胎培养基中使用21MM的4种HEPES缓冲剂（钠、半钠、游离酸、HEPES 钾），通过调整 NaCl 水平，所有培养基的渗-透压保持在 280-295mOsm 之间，pH 在 37°C 下保持在 7.25-7.35 之间。比较了各种培养基在配制后的初始 pH 值、它们在使用 0.1M HCl 或 NaOH 时缓冲 pH 变化以响应酸碱挑战的能力，以及支持小鼠胚胎发-育超过 96 小时的能力。
最终发现半钠 HEPES 溶液 (7.43 ± 0.02) 的 pH 值zui接近小鼠胚胎培养基最终工作的pH 值。钠 (8.63 ± 0.02) 和钾 (8.65 ± .02) HEPES 都是碱性的，则需要大量添加 HCl，而游离酸 HEPES (6.4 ± .09) 是酸性的，需要大量添加 NaOH 才能达到最终所需的工作 pH 值。
总的来说四种HEPES用于小鼠胚胎培养基中，并未产生影响胚胎发-育的毒性。众所周知HEPES在培养基中有着不可撼动的地位，它在细-胞培养中对比其他缓冲剂来说还是有极大的优势，它适用于很多细-胞培养中
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