IVD实验中不同细胞的培养方法，你知道几个
发布时间：
2025-04-27
在IVD（体外诊断）实验领域，细胞培养是一项至关重要的基础技术。不同类型的细胞因其特别的生理特性，需要适配相应的培养方法，才能确保细胞生长，为实验提供可靠的研究对象。下面将详细介绍几种常见细胞的培养方法。
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一、原代细胞培养方法
原代培养是直接从体内获取的组织或细胞进行的起始培养。由于其离体时间短，生物性状与体内状态较为接近，能在特定程度上真实反映体内情况。以从肝脏组织获取肝细胞为例，获取原代细胞主要有组织块法和酶消化法。先将肝脏切成小块，再用镊子、剪刀进一步分离，接着加入胰蛋白酶，于37℃水浴中进行消化，促使肝细胞分离。操作过程需要严格保持无菌状态，所用器械如剪刀、镊子需用酒精灯灼烧后再使用，且动作要轻柔，防止对细胞造成损伤，消化时间也不宜过长，以免过度消化破坏细胞结构。原代细胞对培养基的要求颇高。
常用的基础培养基有DMEM和RPMI - 1640，DMEM营养丰富，适合代谢旺盛的细胞，如成纤维细胞；RPMI - 1640较为温和，适合像淋巴细胞这类敏感细胞。此外，还需添加10% - 20%比例的胎牛血清，血清中富含生长因子及必需微量元素，能促使细胞生长。
在气体环境和温度方面，培养箱内一般维持5% CO₂和95%空气的气体环境，温度恒定在37℃。CO₂与培养液中的水反应生成碳酸，以此维持培养液pH在7.2 - 7.4，这是细胞生长的理想pH范围，过高或过低的pH值都会抑制细胞生长。
二、传代细胞培养方法
传代细胞是原代细胞经过传代培养后形成的细胞系，其生长稳定，相对易于培养。传代方法依据细胞生长特性分为悬浮生长细胞传代、半悬浮生长细胞传代和贴壁生长细胞传代。
三、悬浮生长细胞传代
悬浮生长细胞多采用离心法传代。以1000转/分的速度离心20 - 30秒后，去上层清液，将沉淀的细胞加入新培养液，混匀后即可完成传代。也可采用直接传代法，当悬浮细胞沉淀在瓶壁时，去1/2 - 1/3的上清培养液，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液进行传代。
四、半悬浮生长细胞传代
对于半悬浮生长的细胞，如Hela细胞，部分细胞呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢。可采用直接吹打法，使细胞从瓶壁脱落下来，进而进行传代操作。
五、贴壁生长细胞传代
贴壁生长细胞通常采用酶消化法传代。常用0.25%的胰蛋白酶液作为消化液。加入trypsin - EDTA溶液后，在37°C环境下作用数分钟，通过倒立显微镜观察，当细胞将要分离并呈现圆粒状时，吸掉trypsin - EDTA溶液。随后加入适量含血清的新鲜培养基终止trypsin的作用，离心后吸掉上清液。轻拍培养瓶使细胞从瓶壁脱落，再加入适量新鲜培养基，用吸管上下吸放数次打散细胞团块，混合均匀后，按照稀释比例转移至新的培养瓶中，在正常培养条件下继续培养。
六、干细胞培养方法
干细胞主要分为胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞可分化为三胚层来源的各种细胞，如内胚层的肝细胞、中胚层的心肌细胞以及外胚层的神经细胞等。成体干细胞则具有多向分化潜能，以间充质干细胞为例，能分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等多种细胞类型。 在干细胞培养过程中，维持其干性是关键所在。一旦干性丧失，干细胞就无法正常增殖和分化。同时，干细胞的分化方向和程度具有可调控性，通过添加不同的诱导因子，能够引导干细胞分化为特定的细胞类型，满足不同实验需求。
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在IVD实验中，掌握不同细胞的培养方法是开展研究的基础。无论是原代细胞、传代细胞还是干细胞，只有给予适宜的培养条件，才能让细胞在体外环境中生存，为医学研究和体外诊断技术的发展提供有利的帮助。为维持细胞培养基的生长环境，会用上缓冲剂来稳定，湖北新德晟作为生物缓冲剂研发生产厂家，其供应产品纯度均在99%以上，缓冲性能佳。如果您有采购需要，欢迎随时联系！
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