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蛋白电泳缓冲液全攻略：从类型选择到实验优化，一文掌握关键要点

发布时间：

2025-07-27

在生命科学领域，蛋白质的分离与分析是探索生命奥秘的关键步骤，而蛋白电泳作为实现这一目标的核心技术，其成败在很大程度上取决于电泳缓冲液的选择与使用。面对复杂多样的凝胶体系与研究需求，深入了解缓冲液的类型与特性，成为科研工作者准确把控实验结果的必修课。

Tris粉末

适配不同凝胶体系的缓冲液类型

在众多缓冲液体系中，Tris - 甘氨酸缓冲液凭借出色的分离性能脱颖而出。在 Tris - 甘氨酸凝胶体系内，Tris 充当 pH 稳定剂的作用，而甘氨酸则在电场驱动下构建离子梯度。当应用于 SDS-PAGE 技术时，这种缓冲液能让蛋白质分子摆脱电荷差异的干扰，完全依据分子量大小实现准确分离，在蛋白质分子量测定等实验中发挥着不可替代的作用。

对于 Bis-Tris 凝胶体系，MES 和 MOPS 缓冲液是理想搭档。MES（2 - 吗啉乙磺酸）与 MOPS（3- N - 吗啉丙磺酸）作为两性离子缓冲剂，它们凭借独特的化学结构，能够为较小分子量的蛋白质和核酸分子提供稳定的分离环境，成为生物大分子精细分离的得力助手。

若需分离分子量低于 10kDa 的小分子蛋白质，Tris-tricine 体系一般选择Tricine 缓冲液。Tricine（N - 三（羟甲基）甲基甘氨酸）在低分子量蛋白质分离中展现出较强的优势，能够清晰分辨传统缓冲液难以区分的微小蛋白差异。

变性与非变性缓冲液的功能差异

根据实验需求，蛋白电泳缓冲液可分为变性与非变性两大阵营。变性缓冲液引入 SDS 这一关键角色，这种阴离子表面活性剂不仅赋予蛋白质均一的负电荷，还强制改变蛋白质的空间构象，使其以线性分子形态参与电泳。如此一来，蛋白质的迁移速率仅与分子量相关，这种特性让变性缓冲液成为 Western Blot 等分子量检测实验的 “标配”。

非变性缓冲液则不添加任何变性剂。在这种环境下，蛋白质的电荷性质、空间结构与分子量共同决定其电泳迁移行为。正因如此，非变性缓冲液成为研究蛋白质三维结构、等电点以及蛋白 - 蛋白相互作用的关键因素，尤其是在等电聚焦电泳中，能够助力科研人员捕捉蛋白质的等电点信息。