肌氨酸氧化酶SOX酶学性质
发布时间：
2021-04-16
肌氨酸氧化酶（sarcosineoxidase，SOX）酶学编号EC1.5.3.1，它是肌肉代谢产物肌酐的降解中的第三个酶，肌酐最终降解为甘氨酸、甲醛和过氧化氢。在IVD领域SOX被作为一种重要的诊断酶制剂。
肌氨酸氧化酶在体外诊断领域的应用是基于它的催化原理，可偶联肌酐酶（肌酐亚氨基水解酶）和肌酸酶（肌酸脒基水解酶CRH）将肌酐降解为甘氨酸、甲醛和过氧化氢。肌酐的水平是判断肾脏功能的一个重要参考指标，因此它在医药领域也具有良好的应用前景。
生化检测原料肌氨酸氧化酶
肌氨酸氧化酶的酶活：
以肌氨酸为底物,取50μL不同浓度的SOX酶液,分别加人3mL显色液于1mmo1/L的4-氨基安替比林、6mmo1/L的苯酚、7000U/L的辣根过氧化物酶、20mmo1/L的Tris-HC1缓冲液（pH8.0)中,混匀后加人150μL肌氨酸（0.2mo1/L),振荡混匀,于37℃水浴反应5min,结束后沸水浴煮沸3min终止反应,冷却,于500nm下测定吸光度。酶活单位定义为:在37℃下,每分钟转化1μmoL肌氨酸产生甲醛所需的酶量定义为1个酶活单位（U)。
肌氨酸氧化酶的纯化：
从固体平板挑取单菌落,接人种子培养基,37℃培养过夜。按照体积分数5%的接种量接人发酵培养基,37℃,200r/min，培养至0D6000.6-0.8后,采用1mmo1/L的IPTG诱导8h。菌液破壁离心后,取酶上清液进行纯化,纯化后的酶液置于4℃保存备用。
肌氨酸氧化酶的最适反应温度：
在pH8.0、20mmo1/LTris-HC1缓冲液体系中,在20-80℃范围内测定不同温度下的酶活力,观察温度对酶活性的影响,以确定酶的最适反应温度;
肌氨酸氧化酶的最适pH值：
在不同pH的反应体系（pH4.0-11.0)中测定s0x的酶活力,以酶活力最高的记为100%,计算其他pH条件下的相对酶活力,确定酶促反应的最适pH。不同pH的缓冲液体系为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（pH4.0-5.0),磷酸-磷酸钾缓冲液（pH6.0-7.0),Tris-HC1缓冲液（pH8.0-9.0),碳酸氢钠-Na0H缓冲液（pH10.0-11.0)。
肌氨酸氧化酶可以与色原底物TOPS、过氧化物酶等试剂一起用于血清中肌酐水平的测定，德晟提供的有包括酶制剂括SOX、CRH，色原底物，缓冲剂等在内的多种试剂盒原料。
肌氨酸氧化酶,色原底物TOPS
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