细胞裂解缓冲液的制备原理
发布时间：
2021-06-18
科学家在从细胞中提取DNA或蛋白质进行分析时，特别是在细菌的情况下，使用裂解缓冲液。裂解缓冲液有助于破坏开放的细胞，因此可以改变其内容。一些实例包括盐，去污剂，螯合剂和抑制剂，以及一些碱性化学品。在下文中，将与大家一起探讨裂解缓冲液的制备原理？
1、裂解缓冲液在细胞分裂时，Tris-HCL缓冲液可稳定pH值。Tris-HCL是在pH 8时常见的缓冲化学品之一。HEPES是这些实验中的另一种常见缓冲化学品。氯化钠盐还可以提高离子强度，即细胞外部溶质的总浓度。
2、裂解缓冲液通常还包括螯合剂，例如乙二胺四乙酸（EDTA）或乙二醇四乙酸（EGTA）。这些化学物质与带有两个正电荷的金属离子结合，从而使它们无法用于其他反应。许多DNA酶（咀嚼DNA的蛋白质）和蛋白酶（分解其他蛋白质的蛋白质）需要镁离子才能发挥功能，因此EDTA和EGTA剥夺了它们的这种关键成分，有助于降低蛋白酶或DNAse活性的水平。但是，他们并不能完全排除某些蛋白酶不依赖镁辅助因子的情况，因此裂解缓冲液有时还包含称为蛋白酶抑制剂的化学物质，该化学物质与蛋白酶结合并阻止其正常运行。
3、碱性裂解是一种从细菌中纯化质粒的常用的技术，涉及三种溶液。第一个包含葡萄糖，tris-HCL缓冲液和EDTA。葡萄糖在细菌外部产生高的溶质浓度，因此它们变得有点松弛，使其更易于裂解。EDTA和tris-HCL的功能如前所述。第二种解决方案实际上是裂解细胞。这一种含有SDS去污剂和NaOH，可将pH值提高到12或更高，使细胞内的蛋白质变性并使DNA分离成单链。第三种溶液含有乙酸钾，可将pH恢复到一个更中性的水平，因此质粒DNA链可以重新聚集在一起。同时，变性的蛋白质会聚结并沉淀。
综上所述，大家对于裂解缓冲液的应用与分类应该也有所了解了，而对于裂解缓冲液其成分使用较多的还是Tris-HCL缓冲液，不过因为这款缓冲液的应用领域比较多，导致市场上的存货不多了，让采购者十分苦恼。在这里推荐一下我们公司，湖北新德晟材料有限公司，专业生产生物缓冲剂的厂家，公司成立已有十多年，拥有丰富的产品技术经验。生产效率高，产品质量优，发货速度快，售后有保障，可根据客户进行定制服务与测试服务，并提供专业的技术支持，无论如何，相信我司，一定是您购买生物缓冲剂的不二选择。
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